Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-MERTK/MER para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q12866

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MERTK

• MERTK (também conhecido como MER, RP38, c-Eyk, c-mer, Tyro12) é uma tirosina quinase de receptor que pertence à família de receptores TAM (Tyro3, Axl, Mer). Desempenha papéis críticos na sobrevivência celular, migração, diferenciação e na remoção de células apoptóticas através da eferocitose. Referências relacionadas: PMID:32640697
• Após a ligação do ligante (por exemplo, GAS6, LGALS3, TUB, TULP1), o MERTK sofre autofosforilação no seu domínio intracelular, criando sítios de ancoragem para proteínas adaptadoras como GRB2 e PLCG2. Isso desencadeia a ativação a jusante das cascatas de sinalização MAPK1/2, FAK e RAC1.
• O MERTK é um mediador chave no epitélio pigmentar da retina (RPE), onde regula a fagocitose de fragmentos de segmentos externos de bastonetes, essencial para a manutenção do ciclo visual.
• Atua como um regulador negativo das respostas imunes inatas mediadas por receptores Toll-like (TLR) ao ativar o STAT1 e induzir os supressores de sinalização de citocinas SOCS1 e SOCS3.
• A localização subcelular é principalmente na membrana celular, consistente com a sua função como receptor transmembrana.
• O MERTK é altamente expresso em testículo, ovário, próstata, pulmão e rim, com menor expressão no baço, intestino delgado, cólon e fígado. Não é expresso em linfócitos B e T normais, mas é encontrado em muitas linhagens de células B e T neoplásicas, sublinhando o seu potencial proto-oncogênico.
• A proteína é extensivamente modificada pós-traducionalmente: glicosilação, formação de pontes dissulfeto e fosforilação regulam a sua atividade e estabilidade. Clinicamente, mutações no MERTK estão ligadas à retinite pigmentosa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região extracelular (aa 26-499) do MERTK humano, o que pode gerar anticorpos que reconhecem tanto o receptor de comprimento total quanto domínios extracelulares potencialmente liberados. Considere isso ao interpretar bandas no Western blot, que podem mostrar múltiplas formas em torno de 110 kDa, particularmente em amostras com alta atividade proteolítica.
• Para IHC-P, a recuperação de antígeno usando tampão citrato mediado por calor (pH 6,0) ou tampão EDTA (pH 8,0) pode ser benéfica, uma vez que o MERTK é uma glicoproteína transmembrana. Valide minuciosamente em tecidos de controle positivo, como testículo ou rim.
• Dada a natureza policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada testando em um painel de linhagens celulares positivas e negativas (por exemplo, células transfectadas com MERTK vs. células com MERTK nocauteado). Para IF/ICC, as condições de permeabilização precisam ser otimizadas para detectar pools na superfície celular e intracelulares.
• Relata-se que o anticorpo reage com humano, camundongo e rato; no entanto, o alinhamento de sequência entre o imunógeno e as espécies alvo deve ser confirmado para aplicações que exigem especificidade absoluta de espécie.

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