Anticorpo Monoclonal Anti-Mesotelina para WB, IHC-P, ELISA - Q13421

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Mesotelina

• A Mesotelina é uma glicoproteína de superfície celular codificada pelo gene MSLN, também conhecida como MPF (fator de potencialização de megacariócitos) ou antígeno CAK1.
• A proteína de comprimento total é sintetizada como um precursor de 71 kDa que sofre clivagem proteolítica para produzir uma forma secretada N-terminal de 31 kDa (fator de potencialização de megacariócitos, MPF) e uma mesotelina ligada à membrana C-terminal de 40 kDa.
• A mesotelina ancorada à membrana está ligada à superfície celular através de uma âncora de glicosilfosfatidilinositol (GPI) e está implicada na adesão celular.
• O MPF é secretado e demonstrou potencializar a formação de colónias de megacariócitos in vitro, sugerindo um papel na hematopoiese.
• A mesotelina é predominantemente expressa em células mesoteliais que revestem a pleura, o pericárdio e o peritoneu, e também é encontrada em níveis mais baixos no pulmão, coração, placenta e rim.
• É altamente superexpressa em vários cancros humanos, incluindo mesoteliomas, cancros ováricos e alguns carcinomas de células escamosas, tornando-a um alvo para diagnósticos e terapêuticas oncológicas.
• A proteína sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação, formação de pontes dissulfeto e fosforilação, que são críticas para a sua estabilidade e função.
• A nível subcelular, a mesotelina localiza-se na membrana celular, no aparelho de Golgi e também é encontrada em formas secretadas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange a região C-terminal (aminoácidos 296–606) da mesotelina humana, que corresponde à forma madura ligada à membrana; portanto, espera-se que o anticorpo detete tanto o precursor de comprimento total quanto a subunidade ligada à membrana clivada no Western blot.
• Para Western blot, considere o uso de condições redutoras, pois as pontes dissulfeto podem afetar a migração; o peso molecular previsto da mesotelina madura da membrana é de aproximadamente 40 kDa, mas bandas com pesos moleculares mais altos podem ser observadas devido à glicosilação.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), otimize a recuperação de antigénio e valide em secções de tecido mesotelial ou tumoral conhecidas por superexpressar mesotelina, como biópsias de mesotelioma ou cancro ovárico.
• Para ELISA, emparelhe com um anticorpo de captura que visa um epítopo não sobreposto para avaliar os níveis de mesotelina no soro ou sobrenadantes de cultura celular; note que a forma solúvel MPF também pode ser detetada se o epítopo estiver presente na região N-terminal.

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