Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Mesotelina para WB, IHC-P, ELISA - Q13421

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Mesotelina

• A mesotelina é uma glicoproteína de superfície celular codificada pelo gene MSLN (ID do Gene: 10232) que é sintetizada como um precursor e clivada em uma forma ancorada à membrana e um fator potencializador de megacariócitos (MPF) secretado.
• A forma ligada à membrana está ligada via uma âncora GPI e acredita-se que medeie a adesão celular, potencialmente contribuindo para a metástase tumoral e a disseminação peritoneal.
• O fragmento MPF secretado (também conhecido como antígeno CAK1) demonstrou potencializar a formação de colônias de megacariócitos in vitro, indicando um papel na hematopoiese.
• A mesotelina é localizada principalmente na membrana celular e no aparelho de Golgi, com uma forma solúvel clivada também secretada extracelularmente.
• Em nível proteico, a mesotelina é altamente expressa em mesoteliomas, cânceres de ovário e certos carcinomas de células escamosas, enquanto os tecidos normais mostram expressão limitada nas células mesoteliais, pulmão e em baixos níveis no coração, placenta e rim.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, formação de ligações dissulfeto e fosforilação; a proteína também sofre clivagem em um par de resíduos básicos para produzir as formas maduras.
• O splicing alternativo do transcrito de MSLN gera múltiplas isoformas, contribuindo para a diversidade funcional.
• A mesotelina serve como um biomarcador tumoral promissor e alvo terapêutico devido ao seu padrão de expressão diferencial e envolvimento na progressão do câncer.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio utilizado foi uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 296–606 da Mesotelina humana (NP_037536.2). Esta região cobre a forma madura ligada à membrana, sugerindo que o anticorpo pode reconhecer tanto a forma ancorada à membrana quanto os fragmentos liberados.
• Para Western blotting (WB), espera-se a detecção da mesotelina endógena em aproximadamente 69 kDa; no entanto, devido à glicosilação e clivagem, múltiplas bandas ou um smear podem ser observados. Considere o uso de controles de desglicosilação.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), deve-se antecipar a coloração da membrana em tecidos mesoteliais e tumorais. A coloração nuclear ou citoplasmática deve ser interpretada com cautela.
• Para aplicações de ELISA, o emparelhamento deste anticorpo com um anticorpo de detecção que visa um epítopo não sobreposto pode ajudar a evitar competição. Valide o desempenho no sistema de amostras relevante usando proteína recombinante ou lisados de células tumorais.

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