Anticorpo Monoclonal Anti-METTL14 (Validado por KD) para WB, IHC-P, IP, ELISA - Q9HCE5

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da METTL14

• METTL14 (Proteína 14 semelhante a metiltransferase, também conhecida como hMETTL14) é a subunidade não catalítica do complexo N6-adenosina-metiltransferase.
• No heterodímero com METTL3, a METTL14 atua como o arcabouço de ligação ao RNA que reconhece o mRNA substrato, enquanto a METTL3 fornece a atividade catalítica (PubMed:27281194, PubMed:27373337, PubMed:27627798). Referências relacionadas: PMID:27281194, PMID:27373337, PMID:27627798
• O complexo catalisa a modificação de N6-metiladenosina (m6A) em resíduos de adenina dentro do motivo de consenso 5'-[AG]GAC-3', regulando a estabilidade e o processamento do mRNA (PubMed:24316715, PubMed:24407421, PubMed:25719671). Referências relacionadas: PMID:24316715, PMID:24407421, PMID:25719671
• A metilação m6A funciona como um regulador chave da estabilidade do mRNA, promovendo a desestabilização e degradação do transcrito, afetando a dinâmica da expressão gênica.
• A m6A mediada por METTL14 é crítica para a regulação do relógio circadiano, diferenciação de células-tronco embrionárias e neurogênese cortical (PubMed:24316715, PubMed:24407421, PubMed:25719671). Referências relacionadas: PMID:24316715, PMID:24407421, PMID:25719671
• A proteína localiza-se predominantemente no núcleo.
• A METTL14 também está envolvida na espermatogênese e fertilidade masculina, regulando a diferenciação espermatogonial e a meiose (Por similaridade).
• A METTL14 é uma fosfoproteína identificada em análises proteômicas, com um peso molecular previsto de 52.150 Da.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante abrangendo os aminoácidos 1-210 do METTL14 humano (NP_066012.1). Como esta região está na extremidade N-terminal, considere sua conservação entre espécies se reatividade cruzada for desejada; o alinhamento de sequências pode auxiliar na previsão de reatividade em espécies adicionais.
• Para Western blot (WB), espera-se uma única banda em aproximadamente 52 kDa. Valide a detecção nos lisados de tecido/células das espécies apropriadas, incluindo humano, camundongo e rato.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), a METTL14 mostra coloração nuclear. Otimize as condições de recuperação antigênica e considere o uso de tecidos positivos conhecidos (por exemplo, cérebro, testículo) como controles.
• Para imunoprecipitação (IP), este anticorpo monoclonal de coelho pode capturar eficientemente complexos de METTL14; inclua controles isotípicos apropriados e confirme a co-imunoprecipitação de METTL3 se estiver estudando o heterodímero metiltransferase.
• ELISA: O anticorpo pode ser usado como anticorpo de captura ou detecção se emparelhado com um secundário compatível para quantificação de METTL14; valide a faixa dinâmica e a especificidade do ensaio.

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