Anticorpo policlonal anti-METTL3 para WB, IHC-P, IP, ELISA - Q86U44

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da METTL3

• METTL3 (proteína 3 semelhante à metiltransferase) é a subunidade catalítica do complexo metiltransferase de N6-adenosina, que inclui METTL14 como parceiro regulador. Referências relacionadas: PMID:27281194 PMID:27373337 PMID:27627798
• O heterodímero deposita N6-metiladenosina (m6A) no RNA na sequência consenso 5'-[AG]GAC-3', regulando assim a estabilidade, o processamento, a eficiência da tradução e a edição do mRNA. Referências relacionadas: PMID:22575960 PMID:24284625 PMID:25719671
• A modificação m6A atua como um regulador fundamental da estabilidade do mRNA; a metilação promove a desestabilização e a degradação do mRNA, influenciando processos como a diferenciação de células-tronco embrionárias e o relógio circadiano. A m6A também regula o metabolismo lipídico hepático circadiano. Referências relacionadas: PMID:30428350
• Em resposta a danos no DNA induzidos por UV, a METTL3 metila rapidamente os transcritos poli(A) nos locais de dano, facilitando o recrutamento da polimerase de reparo do DNA POLK. Referências relacionadas: PMID:28297716
• A metilação m6A mediada por METTL3 desempenha papéis críticos na imunidade: inibe a resposta ao interferon do tipo I por meio da metilação de IFNB e atenua a ativação imune inata durante a infecção por SARS-CoV-2 ao modificar o RNA viral. Referências relacionadas: PMID:30559377 PMID:33961823
• A enzima também metila os miRNAs primários (pri-miRNAs), marcando-os para reconhecimento e processamento por DGCR8, vinculando assim a modificação m6A à biogênese de miRNAs. Referências relacionadas: PMID:25799998
• Além de sua atividade catalítica, a METTL3 pode promover a tradução do mRNA ao interagir com fatores de iniciação da tradução no citoplasma, uma função implicada na proliferação de células cancerosas. Referências relacionadas: PMID:27117702
• A METTL3 localiza-se no núcleo, nos speckles nucleares e no citoplasma, sendo amplamente expressa em baixos níveis, com maior expressão no baço, timo, próstata, testículos, ovário, intestino delgado, cólon e leucócitos do sangue periférico.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1–156) da METTL3 humana, tendo como alvo um domínio conservado; isso pode ser adequado para a detecção de METTL3 em diversas aplicações e espécies.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 64 kDa. Recomenda-se validar os níveis de expressão no seu sistema de amostra específico.
• Na imunohistoquímica (IHC-P), considere otimizar a recuperação antigênica e incluir controles teciduais apropriados que expressem METTL3, como testículo e baço.
• Para imunoprecipitação (IP), verifique a compatibilidade com o complexo nativo METTL3-METTL14 e confirme a eficiência de captura nas suas condições experimentais.
• É indicada reatividade cruzada com camundongo e rato; confirme a homologia da sequência-alvo no seu organismo-modelo antes do uso.

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