Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-METTL3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q86U44

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da METTL3

• Identidade da proteína: A subunidade catalítica da N(6)-adenosina-metiltransferase METTL3, também designada proteína semelhante a metiltransferase 3 (hMETTL3) ou MT-A70, é o componente catalítico do complexo RNA N6-metiltransferase METTL3-METTL14.

• Função central da N6-metiltransferase: O heterodímero METTL3-METTL14 catalisa a formação de N6-metiladenosina (m6A) no RNA, preferencialmente em motivos de consenso 5'-[AG]GAC-3'. A modificação m6A regula a estabilidade, o processamento, a eficiência de tradução e a edição do mRNA, influenciando diversos processos biológicos. Referências relacionadas: PMID:22575960 | PMID:24284625 | PMID:25719671 | PMID:27281194 | PMID:27373337 | PMID:27627798

• Papéis biológicos: A metilação m6A mediada pela METTL3 está envolvida na regulação do relógio circadiano, na diferenciação de células-tronco embrionárias e hematopoiéticas, na neurogênese cortical, na homeostase das células T, na espermatogênese, na oogênese e na resposta a danos no DNA.

• Localização subcelular: Predominantemente nuclear com enriquecimento em speckles nucleares; também detectada no citoplasma, consistente com suas funções na modificação de RNA nuclear e promoção da tradução citoplasmática.

• Especificidade de tecido: Expressa de forma ubíqua em baixos níveis; particularmente detectada no baço, timo, próstata, testículo, ovário, intestino delgado, cólon e leucócitos do sangue periférico.

• Modificações pós-traducionais e palavras-chave: Acetilada, fosforilada e sujeita à conjugação de ubiquitina. Possui domínios de ligação a RNA e ligação a S-adenosil-L-metionina, com um peso molecular de 64.474 Da.

• Relevância no câncer: A superexpressão é observada em vários tipos de câncer, promovendo a proliferação celular em parte através de um aumento independente de metiltransferase na tradução do mRNA. Referências relacionadas: PMID:27117702

• Substratos adicionais: Metila miRNAs primários (pri-miRNAs) para facilitar o reconhecimento e processamento pelo DGCR8, e modifica o RNA do SARS-CoV-2 para atenuar a detecção imune inata dependente de RIG-I. Referências relacionadas: PMID:25799998 | PMID:33961823

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Desenho do imunógeno: O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-156 do terminal N do METTL3 humano, que é bem conservado entre humano, camundongo e rato, apoiando suas alegações de reatividade cruzada.
• Western blot (WB): Use lisados de células inteiras ou nucleares; uma banda próxima a 64 kDa é esperada. Valide o desempenho do anticorpo em seu sistema de amostra específico, pois modificações pós-traducionais ou variantes de isoforma podem influenciar a mobilidade.
• Imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC): Recuperação de antígeno pode ser necessária para seções de parafina. Coloração nuclear e de speckles nucleares deve predominar; sinais citoplasmáticos também podem ser observados dependendo do tipo celular e condições de fixação.
• ELISA: O anticorpo pode ser usado como reagente de detecção contra METTL3 recombinante ou antígenos peptídicos; o pareamento com um anticorpo de captura METTL3 pode ser explorado para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.
• Reatividade cruzada: Relatado para reconhecer METTL3 humano, de camundongo e de rato; a verificação com controles positivos e negativos apropriados é aconselhada para cada espécie.

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