Anti-METTL8 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, ELISA - Q9H825

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do METTL8

• METTL8 (proteína 8 semelhante a metiltransferase) também é conhecido como tRNA N(3)-citosina metiltransferase METTL8, mitocondrial, e mRNA N(3)-metilcitosina metiltransferase METTL8. Pertence à superfamília das metiltransferases e utiliza S-adenosil-L-metionina (SAM) como doador de metil.
• Como uma enzima mitocondrial, o METTL8 catalisa especificamente a modificação N(3)-metilcitosina (m3C) na posição 32 do loop do anticódon do tRNA(Ser)(UCN) mitocondrial e do tRNA(Thr). Esta modificação é crucial para a eficiência da tradução mitocondrial e a função adequada da cadeia respiratória. Referências relacionadas: PMID:34774131, PMID:35017528
• A atividade de metilação do METTL8 no tRNA(Ser)(UCN) mitocondrial requer a modificação prévia de N(6)-dimetilaliladenosina(37) (i6A37) pela enzima TRIT1, indicando uma via de modificação hierárquica. Referências relacionadas: PMID:34774131, PMID:35017528
• Foi relatado que o METTL8 medeia a modificação m3C em certos mRNAs, mas a prevalência e o significado biológico desta atividade in vivo permanecem incertos e requerem validação adicional. Referências relacionadas: PMID:28655767, PMID:33313824
• Subcelularmente, o METTL8 localiza-se predominantemente nas mitocôndrias, consistente com o seu papel na modificação de tRNA mitocondrial. A proteína possui um peptídeo de trânsito para importação mitocondrial.
• O gene METTL8 sofre splicing alternativo, potencialmente gerando múltiplas isoformas. O UniProt lista a isoforma revisada com um peso molecular de aproximadamente 33,4 kDa.
• Características principais da proteína incluem formação de ligação isopeptídica, conjugação Ubl e classificação sob palavras-chave de processamento de tRNA e mitocondrial.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para este anticorpo é uma proteína recombinante que cobre a região N-terminal (aminoácidos 1-140) do METTL8 humano. Esta região pode incluir partes do peptídeo de trânsito e do domínio catalítico inicial.
• Para aplicações de Western blot (WB), considere o uso de lisatos enriquecidos em mitocôndrias ou extratos de células inteiras de amostras humanas, de camundongo ou de rato. O peso molecular previsto é de ~33 kDa, mas modificações pós-traducionais ou variações de isoformas podem deslocar a banda.
• Em ELISA, este anticorpo policlonal pode detectar METTL8 nativo e desnaturado. Valide a especificidade do sinal usando controles apropriados, como linhagens celulares com knockdown ou knockout de METTL8.
• A reatividade cruzada com METTL8 de camundongo e rato foi indicada; no entanto, a homologia da sequência deve ser verificada e as condições ideais de trabalho devem ser determinadas empiricamente no seu sistema experimental.
• Para estudos funcionais que ligam o METTL8 à tradução mitocondrial ou à atividade da cadeia respiratória, considere usar este anticorpo em conjunto com isolamento mitocondrial e ensaios de atividade.

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