Anticorpo Monoclonal Anti-MFG-E8 para WB, IF/ICC, ELISA - Q08431

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MFG-E8

• A lactadherina (MFG-E8) é uma glicoproteína de 43 kDa codificada pelo gene MFGE8; o splicing alternativo pode produzir múltiplas isoformas, mas a forma principal contém consistentemente domínios do tipo C semelhantes a EGF e discoidina F5/8.
• Promove a homeostase do epitélio intestinal e a cicatrização da mucosa, além de apoiar a neovascularização dependente de VEGF (angiogênese).
• O MFG-E8 funciona como uma molécula de ponte chave para o clearance fagocitário de células apoptóticas: liga-se à fosfatidilserina em células moribundas e engaja as integrinas αvβ3 e αvβ5 em fagócitos.
• A proteína pode ligar-se diretamente a membranas ricas em fosfatidilserina de maneira independente de receptor e interage com a zona pelúcida, sugerindo um papel na ligação espermatozoide-óvulo.
• É um constituinte principal da amiloide da média aórtica, ligando-a a depósitos vasculares patológicos.
• Subcelularmente, o MFG-E8 é encontrado na membrana celular, secretado para o espaço extracelular e dentro de vesículas citoplasmáticas/secretórias, bem como na membrana acrossômica.
• A especificidade tecidual inclui células epiteliais mamárias, média aórtica e superexpressão em vários carcinomas; também está presente em glóbulos de gordura do leite.
• Modificações pós-traducionais incluem pontes dissulfeto, glicosilação e fosforilação; a proteína é classificada sob palavras-chave como amiloide, angiogênese, adesão celular, fertilização e proteoma de referência secretada.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio C-terminal (aminoácidos 231–387) do MFG-E8 humano, que deve gerar anticorpos que reconhecem a proteína completa de ~43 kDa em western blotting; considere carregar 20–30 µg de lisato reduzido.
• Devido à reatividade cruzada com camundongo e rato, o anticorpo é adequado para estudos multiespécies; valide sempre os níveis de expressão no sistema de amostra escolhido.
• Para IF/ICC, a permeabilização é recomendada porque o MFG-E8 se localiza em membranas e vesículas; otimize a fixação e a diluição do anticorpo para minimizar o ruído de fundo.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode servir como reagente de captura ou detecção; o emparelhamento com um segundo anticorpo que reconhece um epítopo distinto pode melhorar a sensibilidade.

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