Anticorpo Policlonal Anti-MGEA5 para WB, IHC-P, ELISA - O60502

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MGEA5/OGA

• O MGEA5 codifica a Proteína O-GlcNAcase (OGA), também denominada beta-N-acetilglucosaminidase, NCOAT e antígeno 5 expresso em meningioma. O splicing alternativo gera múltiplos isoformas com atividades catalíticas potencialmente distintas.
• O OGA é uma glicosídeo hidrolase que remove especificamente a N-acetilglucosamina O-ligada (O-GlcNAc) dos resíduos de serina/treonina de proteínas alvo, uma modificação pós‑traducional chave que regula sinalização, transcrição e respostas ao estresse. Referências relacionadas: PMID:11148210 PMID:11788610 PMID:20673219
• Ele deglicosila um conjunto diversificado de substratos, incluindo CRYAB, ELK1, GSDMD, LMNB1 e TAB1, modulando assim processos como inflamação, apoptose e organização da cromatina. Referências relacionadas: PMID:28939839 PMID:37962578
• O OGA carece de atividade de histona acetiltransferase e não se liga ao acetil‑CoA, distinguindo-se de enzimas bifuncionais e confirmando seu papel exclusivo como uma O‑GlcNAcase. Referências relacionadas: PMID:24088714
• In vitro, o OGA pode hidrolisar substratos sintéticos como o p‑nitrofenil‑β‑GlcNAc, mas não cliva substratos baseados em GalNAc, demonstrando especificidade estrita. Referências relacionadas: PMID:20673219
• A proteína se localiza tanto no núcleo quanto no citoplasma, permitindo que ela atue sobre fatores nucleares (por exemplo, histonas, fatores de transcrição) e moléculas de sinalização citoplasmáticas, influenciando assim a expressão gênica e o metabolismo celular.
• O OGA é uma fosfoproteína; a fosforilação pode regular sua atividade enzimática, distribuição subcelular ou interações proteína‑proteína, embora as consequências funcionais ainda estejam sob investigação.
• Expresso de forma ubíqua, o OGA apresenta os níveis mais altos de mRNA no cérebro, placenta e pâncreas, tecidos com altas demandas metabólicas e proliferativas, consistente com seu papel no ciclo dinâmico da O‑GlcNAc.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 380‑580, uma região central conservada entre os isoformas; portanto, o anticorpo pode detectar múltiplas variantes de splicing. Verifique se a(s) banda(s) detectada(s) correspondem ao peso molecular esperado (~103 kDa) no seu tipo de amostra.
• Para Western blot (WB), considere usar extratos de células inteiras ou de tecidos de origem humana, de camundongo ou de rato, uma vez que a reatividade cruzada foi confirmada. O OGA é amplamente expresso, mas pode-se observar enriquecimento no cérebro ou na placenta.
• Na imuno-histoquímica (IHC‑P), pode-se antecipar coloração tanto nuclear quanto citoplasmática; inclua controles negativos apropriados (por exemplo, controle isotípico ou bloqueio com peptídeo) para confirmar a especificidade do sinal.
• Ao realizar ELISA, otimize o antígeno de revestimento e as diluições do anticorpo usando amostras positivas conhecidas; a reatividade do anticorpo com proteína recombinante sugere adequação para configurações de ELISA sanduíche ou direto.
• Como os níveis de O‑GlcNAc flutuam com o estresse celular, considere tratar as células com inibidores de O‑GlcNAcase (por exemplo, Thiamet G) para estabilizar a modificação antes da lise, o que pode afetar o reconhecimento de certos epítopos pelo anticorpo.
• Sempre valide o anticorpo no seu contexto experimental específico, pois o desempenho pode variar com os métodos de fixação, recuperação antigênica e sistemas de detecção.

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