Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-MGMT para WB, ELISA - P16455

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MGMT

• O nome oficial da proteína é DNA-metilado--proteína-cisteína metiltransferase, comumente conhecida como O-6-metilguanina-DNA metiltransferase (MGMT). Também é referida como O-6-metilguanina-DNA-alquiltransferase.
• O MGMT é uma enzima chave de reparo de DNA que fornece defesa celular contra os efeitos mutagênicos e citotóxicos de agentes alquilantes. Remove especificamente grupos metil da O6-metilguanina (O6-MeG) e O4-metiltimina (O4-MeT) no DNA.
• O mecanismo de reparo é uma transferência estequiométrica do grupo metil da base nitrogenada danificada para um resíduo de cisteína do sítio ativo na enzima. Esta é uma reação de suicídio, pois a enzima torna-se irreversivelmente inativada após uma única catálise.
• O MGMT está predominantemente localizado no núcleo, onde encontra lesões no DNA genômico.
• A proteína liga um íon de zinco por subunidade, e a coordenação do zinco é provavelmente importante para sua integridade estrutural.
• O MGMT é regulado por fosforilação, conforme indicado pela sua classificação como uma fosfoproteína.
• Palavras-chave associadas ao MGMT incluem dano de DNA, reparo de DNA, metiltransferase, transferase, ligação de metal e proteoma de referência, destacando seu papel estabelecido na manutenção da estabilidade genômica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo monoclonal de coelho foi gerado contra um antígeno peptídico que abrange os aminoácidos 108–207 do MGMT humano. Espera-se que detecte uma banda em ~22 kDa no Western blot em condições redutoras.
• Para Western blot, considere incluir um controle positivo, como lisados de células humanas conhecidas por expressar MGMT (ex: HeLa, HEK293). Um controle de carga deve ser executado em paralelo.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção. Formatos de ELISA indireto ou sanduíche podem ser otimizados; certifique-se de que o antígeno de revestimento apresente o epítopo adequadamente.
• Como a expressão do MGMT pode variar entre tecidos humanos e linhagens celulares, valide o anticorpo em seu sistema experimental para confirmar a reatividade e especificidade.
• O anticorpo é validado para reatividade humana; a reatividade cruzada com outras espécies não foi testada, portanto, o desempenho em modelos não humanos não pode ser garantido.

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