Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-MKRN3 para WB e ELISA - Q13064

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MKRN3

• MKRN3 é uma ligase E3 de ubiquitina com dedo RING, também conhecida como RNF63, ZNF127 e CPPB2, desempenhando um papel crítico no tempo reprodutivo.
• A proteína funciona como um temporizador de desenvolvimento chave, inibindo a ativação prematura da cascata de hormônios reprodutivos, especificamente regulando a expressão do hormônio liberador de gonadotrofina (GNRH1) e a estabilidade do seu mRNA.
• MKRN3 silencia epigeneticamente a transcrição do GNRH1, interrompendo a ligação do MBD3 ao promotor do GNRH1 por meio da ubiquitinação não proteolítica do MBD3 ligada a 'Lys27', modulando assim a metilação regional. Referências relacionadas: PMID:34692086
• Também modula a tradução e estabilidade do mRNA do GNRH1 por meio da ubiquitinação não proteolítica de membros da família PABP (PABPC1, PABPC3, PABPC4) em múltiplos sítios. Referências relacionadas: PMID:33744966
• Além disso, o MKRN3 mantém a estabilidade genômica e epigenômica, regulando a abundância da APEX2 por meio da ubiquitinação ligada a 'Lys-48', direcionando-a para degradação proteassomal. Referências relacionadas: PMID:38705397
• A proteína localiza-se predominantemente no núcleo, consistente com seus papéis regulatórios na transcrição e modulação epigenética.
• O MKRN3 é expresso de forma ubíqua nos tecidos, indicando uma função regulatória ampla além do controle neuroendócrino.
• Contém domínios característicos de dedo de zinco e um motivo de dedo RING, classificando-o como uma transferase ligante de metais na via de conjugação de ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde à região N-terminal (aa 1-260) do MKRN3 humano, potencialmente permitindo a detecção de isoformas de comprimento total e N-terminal; valide a especificidade no seu sistema de amostra.
• Para Western blot, espere uma banda em torno de 56 kDa; considere usar marcadores de peso molecular e confirme a identidade com controles de knockdown ou knockout.
• Relata-se que este anticorpo apresenta reatividade cruzada com o MKRN3 de camundongo, permitindo seu uso em modelos murinos; verifique a reatividade cruzada nas suas condições experimentais.
• Para ELISA, otimize a diluição do anticorpo e as condições de revestimento do antígeno por meio de uma titulação em grade para obter a melhor relação sinal-ruído.
• O anticorpo é adequado para detectar eventos de ubiquitinação proteolítica e não proteolítica envolvendo o MKRN3; considere ensaios de co-IP ou específicos para ubiquitina para estudar essas interações.

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