Anticorpo Monoclonal Anti-MLKL para WB, IHC-P, ELISA - Q8NB16

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MLKL

• MLKL (proteína semelhante ao domínio de quinase de linhagem mista) é uma pseudocinase que desempenha um papel crítico na necroptose induzida por fator de necrose tumoral (TNF), uma via de morte celular programada distinta da apoptose. Referências relacionadas: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• Ele carece de atividade intrínseca de quinase de proteínas e funciona a jusante de RIPK3. Após a fosforilação por RIPK3, a MLKL sofre homotrimerização e transloca para a membrana plasmática, induzindo influxo de cálcio e dano à membrana para executar a morte celular necroptótica. Referências relacionadas: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• A MLKL também medeia a necroptose nuclear desencadeada por infecções virais. Seguindo a ativação por ZBP1, o RIPK3 nuclear fosforila a MLKL, levando à ruptura do envelope nuclear e vazamento de DNA celular para o citosol.
• A proteína se liga a fosfatos de inositol altamente fosforilados, como o inositol hexaquisfosfato (InsP6), o que é essencial para sua função necroptótica. Referências relacionadas: PMID:29883610
• A MLKL localiza-se no citoplasma, membrana celular e núcleo, consistente com seu papel dinâmico na sinalização e execução da morte celular.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas de MLKL, potencialmente contribuindo para a diversidade regulatória.
• Palavras-chave associadas à MLKL incluem ligação de ATP, bobina alfa (coiled coil), necrose, fosfoproteína e ligação de nucleotídeos, refletindo seus domínios estruturais e papel na sinalização de necroptose.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo sintético de MLKL humano; pode reconhecer formas desnaturadas e nativas, suportando aplicações como Western blotting (WB) e ELISA.
• Em Western blot, espera-se uma banda em aproximadamente 54 kDa para MLKL humana e de camundongo; inclua controles positivos apropriados para confirmar a especificidade.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de recuperação de antígeno podem exigir otimização, e a validação usando seções de tecido positivo conhecidas é recomendada.
• A reatividade cruzada do anticorpo com MLKL de camundongo permite seu uso em modelos de necroptose em camundongos; no entanto, o desempenho deve ser validado no sistema experimental relevante.
• Como a MLKL é uma fosfoproteína, considere o papel da fosforilação em seu contexto experimental, pois modificações induzidas por ativação podem afetar a detecção.
• Para ensaios de necroptose, induzir a ativação da MLKL geralmente requer tratamentos combinados (por exemplo, TNF-α, mimético de Smac e um inibidor de caspase); confirme o status de ativação com controles apropriados.

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