Anticorpo Policloal de Coelho Anti-MLKL - Q8NB16

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MLKL

• MLKL (proteína semelhante ao domínio da quinase de linhagem mista) é uma pseudocinase que desempenha um papel central na necroptose induzida por TNF, uma via de morte celular programada.
  Referências relacionadas: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• Após fosforilação pela RIPK3, a MLKL forma homotrímeros, transloca para a membrana plasmática e desencadeia a morte necrótica por meio do influxo de cálcio e rompimento da membrana.
  Referências relacionadas: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• No núcleo, a MLKL pode mediar a necroptose em resposta à infecção por ortomixovírus, levando ao rompimento do envelope nuclear e vazamento de DNA citosólico.
• A MLKL se liga ao hexacisfosfato de inositol (InsP6), que é essencial para sua função necroptótica.
  Referências relacionadas: PMID:29883610
• Subcelularmente, a proteína se localiza no citoplasma, membrana plasmática e núcleo.
• A MLKL sofre splicing alternativo e fosforilação; contém regiões de bobina enrolada e ligação a nucleotídeos, mas não possui atividade quinásica catalítica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para detecção de MLKL endógena por western blot, recomendamos preparar lisados de células tratadas com indutores de necroptose (ex.: TNF + mimético Smac + inibidor de caspase) e incubar o anticorpo em diluições a serem otimizadas.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica, confirme a localização na membrana ou citoplasma; a permeabilização pode ser necessária para a coloração intracelular.
• Para imunohistoquímica (IHC-P), métodos de recuperação de antígeno (ex.: tampão de citrato mediado por calor) podem melhorar o sinal; valide a coloração em tecidos conhecidos como positivos.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato já foi descrita, mas o desempenho deve ser verificado na sua matriz de amostra e protocolo específicos.
• O imunógeno é direcionado à região C-terminal (aa 369-471); este anticorpo pode reconhecer múltiplas isoformas, mas a especificidade para isoformas deve ser confirmada experimentalmente.

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