Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-MLL5/KMT2E para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q8IZD2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de MLL5/KMT2E

• MLL5, também conhecido como leitor de histonas KMT2E, é uma histona-lisina N-metiltransferase 2E inativa que atua como regulador associado à cromatina. Ele se liga à histona H3 trimetilada na Lisina 4 (H3K4me3) por meio do seu domínio dedo PHD, mediando a interação da cromatina downstream dos sítios de início da transcrição de genes ativos. Referências relacionadas: PMID:23798402 PMID:24130829

• Desempenha um papel chave na hematopoiese, regulando a diferenciação mieloide terminal e a auto-renovação de células-tronco hematopoiéticas por meio de um mecanismo que envolve metilação do DNA (Por similaridade).

• MLL5 participa da regulação do ciclo celular em múltiplos estágios, incluindo a transição G1/S, progressão da fase S e entrada na mitose. É recrutado para promotores responsivos a E2F1 por HCFC1, onde estimula H3K4me3 e a ativação transcricional, facilitando a transição da fase G1 para S. Referências relacionadas: PMID:14718661 PMID:18573682 PMID:19264965 PMID:23629655

• A isoforma NKp44L funciona como ligante celular para o receptor de citotoxicidade natural NCR2/NKp44, atuando potencialmente como um sinal de perigo na imunidade inata mediada por células NK.

• Subcelularmente, MLL5 se localiza no núcleo (nucleoplasma e speckles nucleares), mas também pode ser encontrada no citoplasma, centrossomo e membrana celular dependendo da isoforma e do contexto celular.

• A proteína é amplamente expressa em tecidos adultos e fetais, com níveis mais altos no timo fetal e rim, e tecidos hematopoiéticos adultos, jejuno e cerebelo. A isoforma NKp44L não é detectada em células circulantes saudáveis, mas é expressa em muitas linhagens celulares tumorais e transformadas. Referências relacionadas: PMID:12101424 PMID:23958951

• Estruturalmente, MLL5 possui um domínio SET (metiltransferase inativa), dedo PHD e regiões de coilido-enrolado, e está sujeito a modificações pós-traducionais incluindo fosforilação e ubiquitinação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 200-500, uma região que contém o domínio dedo PHD. Este anticorpo pode ser particularmente adequado para detectar MLL5 ligado à cromatina em aplicações relacionadas a ChIP se adaptado.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de ~205 kDa; considere usar um gel de baixa porcentagem e tempos de transferência estendidos. Valide a especificidade com controles apropriados, pois existem múltiplas isoformas.
• Em imunofluorescência e imuno-histoquímica, MLL5 pode exibir padrões de coloração de speckles nucleares ou centrossomais dependendo do tipo de célula e da fixação. Inclua etapas de permeabilização e co-coloração com marcadores de organelas.
• Para ELISA, use o imunógeno proteico recombinante como antígeno de revestimento positivo para estabelecer as condições do ensaio. A reatividade cruzada com MLL5 de camundongo e rato pode permitir testes multiespécies.

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