Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-MMACHC para WB, ELISA - Q9Y4U1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MMACHC

• MMACHC (cblC) é uma chaperona citosólica de cobalamina e uma enzima com atividades duplas: cianocobalamina redutase (eliminação de cianeto) e alquilcobalamina desalquilase (transferase de glutationa).
• Catalisa a descianação redutiva da cianocobalamina (B12 dietético inativo) em cob(II)alamina usando FAD/FMN e NADPH, uma etapa crítica para a produção dos cofatores ativos metilcobalamina e adenosilcobalamina. Referências relacionadas: PMID:18779575, PMID:19700356, PMID:21697092
• MMACHC também funciona como uma desalquilase dependente de glutationa, convertendo metilcobalamina e adenosilcobalamina em cob(I)alamina, permitindo a interconversão celular de cofatores. Referências relacionadas: PMID:19801555, PMID:21697092, PMID:22642810
• Forma um complexo de transporte com ABCD4 e LMBRD1 para mediar a exportação lisossomal da cobalamina para o citosol. Referências relacionadas: PMID:25535791
• No citosol, o MMACHC se monta em um complexo multiproteico com MMADHC, MTRR e MTR para transportar com segurança a cobalamina até a metionina sintase. Referências relacionadas: PMID:21071249, PMID:27771510
• A proteína é amplamente expressa, com os níveis mais altos em fígado fetal e tecidos linfoides; é fracamente expressa em leucócitos do sangue periférico.
• Palavras-chave incluem ligação a FAD, FMN, NADP; manuseio de cofatores de cobalto e cobalamina; e associação com variantes de doença da acidúria metilmalônica e homocistinúria tipo C.
• O UniProt observa um peso molecular de 31,7 kDa, consistente com a banda observada de 32 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 63-282) cobre o domínio catalítico central; a reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada, mas valide em seu sistema de amostra específico.
• Para WB, espere uma banda próxima a 32 kDa; a inclusão de um controle positivo (por exemplo, lisado de HeLa ou fígado) é recomendada.
• Para ELISA, a natureza policlonal pode fornecer um sinal robusto; considere formatos de ELISA direto ou sanduíche dependendo dos requisitos do ensaio.
• Otimize a diluição do anticorpo primário empiricamente, pois o desempenho pode variar com o tipo de amostra e as condições experimentais.
• Observe que o MMACHC é amplamente expresso, mas pode ser baixo em leucócitos; escolha tecidos/linhas celulares de acordo.

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