Anticorpo Policlonais de Coelho Anti-MMP1 para WB, ELISA - P03956

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MMP1

• MMP1 (colagenase intersticial ou colagenase de fibroblasto) é um membro da família das metaloproteinases da matriz que cliva os colágenos I, II e III em um único sítio helicoidal, além dos colágenos VII e X.
  Referências relacionadas:
  PMID:1645757 PMID:2153297 PMID:2557822

• Durante a infecção pelo HIV, a MMP1 interage e cliva a proteína Tat viral secretada, reduzindo a neurotoxicidade mediada por Tat.
  Referências relacionadas:
  PMID:16807369

• Sintetizada como um zimogênio inativo (pro-MMP1), a ativação requer a clivagem autocatalítica do propeptídeo, regulada pela troca de cisteína e o motivo de ligação ao zinco.

• A enzima secretada se localiza no espaço extracelular e na matriz extracelular, onde medeia a degradação do colágeno e a remodelação tecidual.

• Estruturalmente, a MMP1 possui um peptídeo sinal, propeptídeo, domínio catalítico com sítio de ligação ao zinco e um domínio semelhante à hemopexina; é uma glicoproteína com pontes dissulfeto estabilizadoras.

• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e possivelmente glicosilação, que podem influenciar a atividade enzimática e as interações extracelulares.

• O gene humano MMP1 codifica uma proteína com peso molecular calculado de aproximadamente 54 kDa, que atua como uma metaloprotease dependente de cálcio.

• A MMP1 participa da renovação da matriz extracelular, contribuindo para processos como cicatrização de feridas, desenvolvimento embrionário e destruição patológica da matriz.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 20-280) abrange os domínios propeptídeo e catalítico, podendo reconhecer tanto as formas pró quanto ativa da MMP1, o que o torna adequado para detecção total de MMP1 em WB.
• Em condições redutoras de WB, a forma pró (~54 kDa) e a forma ativa (~44 kDa) podem ser resolvidas; valide os tamanhos das bandas com controles adequados.
• Para ELISA, considere emparelhar este anticorpo com um anticorpo de captura monoclonal que visa um epítopo distinto para aumentar a especificidade; teste a reatividade cruzada na matriz de amostra relevante.
• Supernatantes de cultura de células ou homogenatos de tecido são tipos de amostra recomendados; para detecção intracelular, um inibidor de secreção (por exemplo, brefeldina A) pode melhorar o sinal.
• Inclua controles positivos (por exemplo, fibroblastos estimulados por PMA) e controles negativos para confirmar a indução de MMP1 e a especificidade do anticorpo.

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