Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-MMP12 para WB, IF/ICC, ELISA - P39900

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MMP12

• A metaloelastase de macrófagos (MMP-12, também conhecida como ME, HME, MMP12) é uma metaloproteinase da matriz secretada que pertence à família das endopeptidases dependentes de zinco.
• A MMP-12 apresenta atividade elastolítica significativa e está envolvida na lesão e remodelação tecidual, com preferência por leucina no sítio P1' e resíduos aromáticos/hidrofóbicos em P1.
• A enzima é expressa principalmente em macrófagos alveolares e não é detectada em monócitos do sangue periférico, destacando seu papel na homeostase do tecido pulmonar e na inflamação.
• Subcelularmente, a MMP-12 é secretada para o espaço extracelular e se localiza na matriz extracelular, onde degrada a elastina e outros componentes da matriz.
• Como membro da família das MMPs, contém domínios característicos, incluindo um pró-peptídeo que mantém a latência (forma de zimogênio), e requer cálcio e íons zinco para sua atividade.
• As características estruturais incluem pontes dissulfeto e glicosilação, conforme indicado pelas palavras-chave do UniProt; uma estrutura 3D já foi determinada.
• A proteína de comprimento total tem um peso molecular previsto de ~54 kDa (calculado em 54002 Da), o que corresponde à banda observada no Western blotting.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi um peptídeo sintético correspondente aos resíduos 200-300 da MMP-12 humana (NP_002417.2). Ao planejar experimentos, considere que esta região está dentro do domínio catalítico e pode reconhecer tanto a forma pró quanto a ativa, mas não se sobrepõe ao peptídeo sinal.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 54 kDa; no entanto, a glicosilação pode causar pequenos desvios na migração. Valide o tamanho da banda observada no seu sistema de amostra específico.
• Em IF/ICC, a MMP-12 é secretada, portanto as condições de permeabilização e fixação devem ser otimizadas para reter o sinal associado à matriz extracelular. A co-coloração com marcadores de macrófagos pode ajudar a confirmar a especificidade em cortes de tecido.
• Para aplicações de ELISA, recomenda-se o uso de MMP-12 recombinante ou padrões de proteína purificada para estabelecer curvas de calibração e avaliar a eficiência de ligação do anticorpo.

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