Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-MMP13 para WB, IF/ICC, ELISA - P45452

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MMP13

• A colagenase 3 (MMP-13) é uma metaloproteinase da matriz secretada codificada pelo gene MMP13, com massa molecular prevista de 53,8 kDa e uma banda observada de ~54 kDa em western blotting.
• Ela cliva principalmente colágenos fibrilares de hélice tripla, apresentando maior atividade contra o colágeno solúvel tipo II, mas também degrada os tipos I, III, IV, X e XIV, além de fibronectina e tenascina.
• A MMP13 pertence à família das metaloproteases dependentes de zinco e cálcio; requer cálcio para estabilidade e contém domínios conservados típicos das MMPs.
• A enzima é secretada no espaço extracelular e na matriz, onde exerce suas funções catalíticas.
• A expressão é detectada na cartilagem fetal, condrócitos hipertróficos, osteoblastos, células periósticas e linfócitos T ativados; também é encontrada no tecido de carcinoma de mama.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e glicosilação; a forma zimogênica contém um peptídeo sinal e ligações dissulfeto conservadas.
• A MMP13 é essencial para o desenvolvimento ósseo embrionário normal, ossificação do esqueleto e cicatrização de fraturas ósseas; também promove a migração de queratinócitos na cicatrização de feridas e pode facilitar a invasão de células tumorais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos resíduos 350–450 da MMP13 humana, que se encontra em uma região provavelmente conservada na enzima ativa.
• Para western blotting, uma banda única próxima de 54 kDa é tipicamente observada em condições redutoras; valide a expressão em linhagens celulares ou lisados de tecido apropriados.
• Em imunofluorescência/ICC, é esperado sinal na matriz extracelular e na via secretora; considere a marcação dupla com marcadores de organelas.
• Aplicações em ELISA podem exigir o pareamento com um anticorpo de captura adequado; teste a linearidade usando padrões recombinantes de MMP13.
• Como a MMP13 é uma proteína secretada, sobrenadantes de cultura celular ou extratos de tecido são tipos de amostra adequados.

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