Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-MMP14/MT1-MMP para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P50281

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MMP14/MT1-MMP

• A metaloproteinase de matriz-14 (MMP14), também designada MT1-MMP, é uma metaloproteinase de tipo membranar sintetizada como um zimogénio que requer clivagem proteolítica para ativação. Contém ligações dissulfeto características, locais de ligação a cálcio e zinco e é regulada por fosforilação.
• Como uma endopeptidase, a MMP14 degrada vários componentes da matriz extracelular, mais notavelmente o colagénio, e é essencial para a colagenólise pericelular e remodelação do tecido conjuntivo (PubMed:8015608).
  Referências relacionadas:
  PMID:8015608
• A MMP14 ativa a pró-gelatinase A (pró-MMP2) por clivagem proteolítica, funcionando assim como um regulador positivo do crescimento e migração celulares. Também contribui para a formação de tecidos fibrovasculares juntamente com a pró-MMP2 (PubMed:22065321, PubMed:12714657).
  Referências relacionadas:
  PMID:22065321
  PMID:12714657
• A enzima atua como um regulador da sinalização Notch ao mediar a clivagem e inibição do ligando DLL1 (PubMed:21572390).
  Referências relacionadas:
  PMID:21572390
• A MMP14 cliva ADGRB1 para libertar vasculostatina-40, um inibidor da angiogénese, e também cliva e inativa o recetor GDF15 GFRAL, modulando a resposta aversiva GDF15-GFRAL (PubMed:22330140, PubMed:35177851).
  Referências relacionadas:
  PMID:22330140
  PMID:35177851
• A localização é principalmente na membrana celular, mas a MMP14 também é detetada em melanossomos e no citoplasma, consistente com o seu papel na proteólise pericelular e sinalização intracelular.
• A expressão é proeminente nas células estromais do cólon, mama e cabeça e pescoço, bem como em tumores pulmonares, alinhando-se com a sua função na remodelação do microambiente tumoral.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que mapeia os aminoácidos 75–174 dentro do domínio extracelular da MMP14 humana, uma região conservada entre humanos, camundongos e ratos – consistente com a reatividade cruzada relatada.
• Para western blotting, a pró-enzima corre cerca de 66 kDa; formas ativas e processadas podem aparecer em pesos moleculares mais baixos. Valide os padrões de banda usando lisados de células ou tecidos relevantes (por exemplo, células de fibrossarcoma HT‑1080, tecido placentário).
• Em imuno-histoquímica (IHC‑P), a recuperação de antigénio pode ser necessária; teste em secções embebidas em parafina de amostras de tumores de cólon, mama ou pulmão. É esperada coloração estromal.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), é necessária a permeabilização para detetar MMP14 citoplasmática e membranar. Use controlos de isotipo apropriados.
• As aplicações de ELISA devem considerar o emparelhamento com um anticorpo de captura contra um epítopo distinto; a natureza policlonal do anticorpo pode oferecer um sinal robusto quando usado como detetor.
• Como com todos os anticorpos policlonais, a consistência entre lotes deve ser verificada no sistema de ensaio pretendido.

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