Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-MMP2 para WB e ELISA - P08253

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MMP2

• A MMP2, também conhecida como colagenase tipo IV de 72 kDa, gelatinase A e CLG4A, é uma metaloproteinase de matriz expressa ubiquamente que desempenha papéis críticos na degradação da matriz extracelular e remodelação tecidual.
• Suas funções principais incluem remodelação da vasculatura, promoção da angiogênese, facilitação do reparo tecidual, invasão e metástase tumoral, inflamação e ruptura de placas ateroscleróticas. Também processa substratos não matriciais, como a big endotelina-1 e o CGRP do tipo β, promovendo vasoconstrição, e cliva KISS em uma ligação Gly-Leu.
• O domínio PEX C-terminal exerce atividades antiangiogênicas e antitumorais, inibindo a migração e adesão celular ao FGF2 e vitronectina, atuando como um ligante para a integrina αvβ3 nos vasos sanguíneos.
• A MMP2 media a proteólise de CHUK/IKKA, desencadeando uma resposta imune inata primária via sinalização de estresse mitocondrial-nuclear e ativação das vias transcricionais NF-κB, NFAT e IRF.
• A localização subcelular inclui secreção no espaço/matriz extracelular, bem como presença na membrana, núcleo, citoplasma e mitocôndrias.
• A MMP2 é produzida por fibroblastos de pele normais, e seu fragmento PEX é expresso em vários tumores, incluindo gliomas, câncer de mama e de próstata.
• Características estruturais-chave incluem um peptídeo sinal, pró-peptídeo (forma zimogênio), domínio catalítico com sítio de ligação ao zinco, domínio tipo II de fibronectina e um domínio C-terminal semelhante à hemopexina; sofre clivagem autocatalítica e múltiplas modificações por fosforilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio C-terminal semelhante à hemopexina (aa 451–660), que é exclusivo da MMP2 entre os membros da família MMP; espera-se que esta região confira especificidade ao alvo nas aplicações de western blot e ELISA.
• Para western blot de MMP2, considere incluir controles positivos apropriados (por exemplo, lisados de tecidos/células humanos, de camundongo ou rato conhecidos por expressar MMP2, como fibroblastos ou linhagens tumorais) e use condições redutoras para detectar a forma pró de ~74 kDa e a forma ativa de ~64 kDa.
• No ELISA, combine este anticorpo com um anticorpo de detecção adequado (por exemplo, outro clone que reconheça um epítopo distinto) para formatos sanduíche; a pré-validação do par de anticorpos na matriz de amostra relevante é recomendada.
• Como a MMP2 é secretada, considere preparar meio condicionado ou sobrenadantes de cultura privados de soro para enriquecer a proteína, particularmente ao investigar níveis endógenos em amostras de baixa abundância.

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