Anticorpo Monoclonal Anti-Mouse CD3 para Citometria de Fluxo - P04235 / P22646

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD3

• A proteína alvo, CD3δ (glicoproteína de superfície de células T cadeia delta CD3), é um componente central do complexo TCR-CD3 presente na superfície dos linfócitos T, onde desempenha um papel essencial nas respostas imunes adaptativas.
• Juntamente com CD3ε, CD3γ e CD247/CD3ζ, o CD3δ transmite sinais mediados por TCR através da membrana celular após o reconhecimento de antígeno pelo receptor de células T (TCR), desencadeando vias de sinalização a jusante.
• Todas as cadeias CD3 contêm motivos de ativação baseados em tirosina de imunorreceptores (ITAMs) em seus domínios citoplasmáticos. Após o engajamento do TCR, esses ITAMs são fosforilados pelas quinases da família Src LCK e FYN, levando à ativação de cascatas de sinalização.
• O CD3δ desempenha um papel crítico na diferenciação de timócitos, garantindo a montagem intracelular correta e a expressão na superfície do complexo TCR-CD3; sem um complexo funcional, os timócitos falham na diferenciação adequada. Referências relacionadas: PMID:10935641
• O CD3δ interage com os correceptores CD4 e CD8, estabelecendo uma ligação funcional entre o TCR e essas moléculas, que é necessária para a ativação e seleção positiva das células T CD4+ ou CD8+.
• A proteína CD3δ é uma glicoproteína transmembrana com um peptídeo sinal, uma única hélice transmembrana e um domínio citoplasmático contendo ITAM. Está sujeita a fosforilação e formação de ligações dissulfeto.
• O CD3ε, o segundo alvo reconhecido por este anticorpo, compartilha semelhanças estruturais e funcionais com o CD3δ e também faz parte do complexo TCR-CD3, contribuindo para a transdução de sinais e o desenvolvimento de células T.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético derivado de CD3 de camundongo, sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo linear conservado entre as cadeias δ e ε, consistente com sua reatividade dupla.
• Para citometria de fluxo (FC), considere titular o anticorpo para determinar a concentração ideal para sua população específica de linfócitos de camundongo. Valide a coloração em amostras de células T em repouso e ativadas.
• Como este é um anticorpo monoclonal de rato, certifique-se de usar reagentes de detecção secundários anti-rato apropriados ou estratégias de conjugação direta se estiver multiplexando com outros anticorpos.
• Devido aos pesos moleculares previstos (19 kDa para CD3δ, 21 kDa para CD3ε), o anticorpo também pode ser adequado para Western blotting em condições desnaturantes, embora os dados do fabricante suportem FC. Considere a validação interna se estiver explorando aplicações adicionais.

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