Anticorpo Monoclonal Anti-Rato CD4 (APC/Cianina7) para Citometria de Fluxo - P06332

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD4

• O gene Cd4 codifica a glicoproteína CD4 de superfície de células T, produzindo uma proteína de membrana de tipo I de passagem única com quatro domínios extracelulares semelhantes a imunoglobulinas, uma hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática curta. A proteína de rato, também conhecida como L3T4 ou Ly-4, compartilha essa arquitetura e desempenha um papel central na imunidade adaptativa.
• CD4 atua como um coreceptor para moléculas MHC de classe II. Em células T auxiliares, ele se liga ao mesmo complexo MHC-peptídeo reconhecido pelo receptor de célula T (TCR), aumentando assim a afinidade geral da interação e facilitando a ativação de células T.
• Após a ligação ao MHC, o CD4 recruta a quinase LCK da família Src para o complexo TCR-CD3. Isso desencadeia cascatas de fosforilação que levam à produção de linfocinas, motilidade de células T, adesão e ativação completa das células T auxiliares.
• O CD4 é essencial para o desenvolvimento de células T auxiliares no timo e para a diferenciação de monócitos em macrófagos funcionais. Ele também participa da ativação e expressão de citocinas em macrófagos, células dendríticas e células NK, muitas vezes de maneira independente de TCR/LCK.
• Subcelularmente, o CD4 está predominantemente localizado na membrana celular, onde se associa a "lipid rafts" e sofre modificações pós-traducionais, incluindo palmitoilação, glicosilação ligada a N e fosforilação. Essas modificações regulam sua localização na membrana e suas funções de sinalização.
• Especificidade tecidual em rato: altamente expresso em células T auxiliares, também presente em níveis mais baixos em macrófagos, células dendríticas e células NK. Sua expressão é uma característica marcante da linhagem T auxiliar.
• A proteína é membro da superfamília das imunoglobulinas e contém múltiplas pontes dissulfeto, características que contribuem para sua estabilidade estrutural e capacidade de interagir com seus ligantes.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno é uma proteína recombinante, o anticorpo pode reconhecer um epítopo linear; leve isso em consideração ao realizar recuperação de antígeno ou "western blots" desnaturantes, embora este anticorpo seja recomendado para citometria de fluxo não desnaturante.
• Para citometria de fluxo, faça a titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal para sua população de células, e inclua controles de isotipo apropriados e controles de compensação monocor quando usar a fluorescência APC/Cianina7.
• Prepare suspensões de células únicas de órgãos linfoides (baço, linfonodos, timo) ou sangue periférico, e bloqueie os receptores Fc para minimizar a ligação não específica antes da coloração.
• Valide a expressão na cepa de rato e tecido relevante; observe que o CD4 é altamente expresso em células T auxiliares, mas também pode ser detectado em subconjuntos de macrófagos, células dendríticas e células NK.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Integrada

A CamelBio apoia fabricantes de diagnósticos e instituições de pesquisa ao fornecer um portfólio abrangente de matérias-primas para IVD, incluindo pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados e reagentes auxiliares a granel. Para projetos focados em imunologia visando CD4 e marcadores de células imunes relacionados, a CamelBio pode fornecer combinações prontas para uso de anticorpo-conjugado, matérias-primas para alvos raros e pacotes de reagentes personalizados adaptados às necessidades do desenvolvimento do seu ensaio — preenchendo a lacuna entre a descoberta e a aplicação clínica.