Anticorpo Monoclonal Anti-Mouse CD45 () para IF/ICC, FC - P06800

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CD45

• CD45, também conhecida como antígeno comum de leucócitos (L-CA), Ly-5 e T200, é uma fosfatase de tirosina tipo receptor C codificada pelo gene Ptprc em camundongos.
• É essencial para a ativação de células T; após o acoplamento ao receptor de antígeno, a CD45 regula positivamente a coativação por meio da ligação à DPP4.
• A proteína contém dois domínios fosfatase intracelulares em tandem; o primeiro domínio é cataliticamente ativo, enquanto o segundo modula a especificidade do substrato (Por similaridade).
• A CD45 desfosforila moléculas de sinalização chave, incluindo SKAP1, FYN e LYN, modulando assim a atividade da LYN e a sinalização downstream do TCR.
• Na sinapse imunológica, a CD45 se localiza nas membranas de lipid rafts e interage com CLEC10A nas células dendríticas, ajustando os limiares de ativação de células T para prevenir a autoimunidade.
• Existem múltiplas isoformas de CD45 devido ao splicing alternativo, com pesos moleculares variando de 130 a 144 kDa; a proteína é intensamente glicosilada e fosforilada.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para imunofluorescência (IF/ICC): As condições de fixação e permeabilização podem afetar a acessibilidade do epitopo; considere testar protocolos de fixação com metanol versus paraformaldeído.
• O imunógeno abrange uma grande porção do domínio extracelular (aa 26–566), sugerindo potencial reconhecimento de múltiplas isoformas de CD45; valide a especificidade da isoforma no seu contexto experimental, se necessário.
• Para citometria de fluxo (FC): Titule o anticorpo para determinar a concentração ideal de coloração e inclua sempre controles de isótipo adequados.
• A CD45 é amplamente expressa em todos os leucócitos; portanto, espere coloração generalizada em tecidos linfoides e use marcadores específicos de linhagem para a delimitação precisa de populações celulares.

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