Anticorpo Monoclonal Anti-Camundongo CD45R/B220 (Biotina) para Citometria de Fluxo - P06800 / P08575

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CD45R/B220

• CD45R/B220, codificado por Ptprc, é uma isoforma da tirosina-proteína fosfatase tipo receptor C, também conhecida como antígeno comum leucocitário (L-CA), antígeno linfocitário 5 (Ly-5) ou T200. É uma glicoproteína transmembrana expressa principalmente em células hematopoiéticas.
• A proteína é um regulador chave da ativação de células T, atuando como uma molécula coestimuladora positiva após a ligação ao DPP4. Contém dois domínios PTPase intracelulares em tandem; o primeiro possui atividade enzimática, enquanto o segundo modula a especificidade do substrato.
• Após o engajamento do receptor de células T, o CD45 recruta e desfosforila moléculas de sinalização como SKAP1, FYN e LYN, ajustando assim o limiar de ativação e prevenindo a autorreatividade.
• O CD45 interage com o CLEC10A em células apresentadoras de antígenos na sinapse imunológica; essa interação em células dendríticas imaturas reconhece o CD45 portador do antígeno Tn em células T efetoras, contribuindo para a tolerância periférica.
• A isoforma B220 é gerada por splicing alternativo e é predominantemente expressa em linfócitos B e algumas células T ativadas, servindo como um marcador pan-B clássico em camundongos.
• Subcelularmente, o CD45 localiza-se na membrana celular, jangadas lipídicas (lipid rafts) e na sinapse imunológica, onde seu agrupamento e exclusão de microdomínios de sinalização influenciam sua atividade.
• As modificações pós-traducionais incluem extensa glicosilação ligada a N e O, que afetam sua conformação e interações com ligantes.
• A proteína de camundongo tem um peso molecular previsto de ~144 kDa, mas variações de glicosilação e isoformas resultam em bandas observadas entre 130 kDa e 144 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo biotinilado para determinar a concentração ideal para sua população celular específica. Inclua controles de isotipo apropriados e garanta o bloqueio do receptor Fc, quando necessário.
• Como o anticorpo é biotinilado, a detecção requer um reagente secundário de estreptavidina ou avidina conjugado com fluoróforo. Escolha um conjugado de estreptavidina com reatividade cruzada mínima para a espécie da sua amostra.
• Valide a especificidade da coloração em linhagens celulares conhecidas como positivas e negativas para CD45R/B220 (por exemplo, esplenócitos de camundongo ou linhagens de células B) para confirmar o desempenho.
• Para painéis multicoloridos, verifique a sobreposição espectral e use controles de compensação de coloração única.
• Alternativamente, o anticorpo pode ser usado em outras aplicações após validação, mas é otimizado principalmente para citometria de fluxo.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Completa

A CamelBio atua como um parceiro de fornecimento abrangente para matérias-primas de IVD, oferecendo pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados, reagentes auxiliares a granel e fornecimento de matérias-primas de alvos raros. Para pesquisadores focados em biologia de linfócitos e sinalização de células T, nosso portfólio inclui anticorpos de alta qualidade como este clone anti-CD45R/B220, apoiando a imunofenotipagem baseada em citometria de fluxo e o desenvolvimento de ensaios diagnósticos.