Anticorpo Monoclonal Anti-CD8a de Camundongo () para Citometria de Fluxo - P01731

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CD8a

• CD8a, também conhecido como Lyt-2, é uma glicoproteína de superfície das células T e membro da superfamília das imunoglobulinas.
• Funciona como correceptor das moléculas do MHC de classe I, interagindo simultaneamente com o receptor das células T e o MHC de classe I nas células apresentadoras de antígenos.
• Após o reconhecimento do antígeno, CD8a recruta a quinase Src LCK para o complexo TCR-CD3, iniciando a sinalização intracelular para a ativação das células T, a produção de citocinas e as respostas citotóxicas.
• Nos linfócitos T citotóxicos (CTLs), esse mecanismo permite o reconhecimento e a eliminação de células infectadas ou tumorais.
• Nas células NK, os homodímeros de CD8A promovem a sobrevivência e a eliminação serial de células-alvo, além de apoiarem a diferenciação em células T CD8 de memória.
• A proteína está localizada na membrana celular, possui um domínio transmembranar de passagem única e contém um domínio extracelular semelhante à imunoglobulina.
• As principais modificações pós-traducionais incluem glicosilação, formação de pontes dissulfeto e palmitoilação, importantes para sua estabilidade e função.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 28-196), que se sobrepõe à região de ligação ao MHC de classe I; portanto, é provável que o anticorpo reconheça a proteína de superfície nativa. Considere validar a ligação em células vivas por FC.
• Para citometria de fluxo, a concentração ideal do anticorpo deve ser titulada em linfócitos de camundongo (por exemplo, esplenócitos ou timócitos) como controle positivo. Utilize um controle de isotipo apropriado.
• Como CD8a é uma proteína transmembranar, as etapas de fixação e permeabilização normalmente não são necessárias para a marcação de superfície, mas certifique-se de que as células sejam mantidas viáveis durante o processamento.
• Se utilizado em combinação com outros anticorpos conjugados a fluoróforos, verifique a possível sobreposição espectral com (semelhante ao FITC).

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