Anticorpo Monoclonal Anti-Mouse F4/80 (Biotina) para Citometria de Fluxo - Q61549

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de F4/80

• F4/80 (Adgre1, Emr1) é o receptor E1 acoplado à proteína G de adesão de camundongo, uma glicoproteína da superfície celular e membro da família EGF-TM7 de GPCRs de classe B.
• É um receptor órfão envolvido na adesão celular e nas interações célula-célula, particularmente no sistema imune; também pode desempenhar um papel no desenvolvimento de células T reguladoras (Treg).
• Em camundongos, F4/80 é expresso em macrófagos, mas está ausente nos macrófagos localizados nas áreas de células T dos linfonodos e do baço; apresenta baixa expressão em monócitos sanguíneos, o que o torna um marcador pan-macrofágico bem estabelecido.
• A proteína é um receptor transmembrana multipasso localizado na membrana celular.
• Estruturalmente, contém domínios semelhantes ao EGF e um domínio de autoproteólise e indução de GPCR (GAIN); prevê-se que contenha múltiplas ligações dissulfeto e sítios de glicosilação.
• As palavras-chave atribuídas pelo UniProtKB incluem: imunidade adaptativa, sinalização de cálcio (típica dos GPCRs), membrana celular, glicoproteína e atividade de receptor.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo, otimize a concentração do anticorpo por titulação utilizando a população celular-alvo; as diluições iniciais típicas para conjugados de biotina variam amplamente e devem ser determinadas experimentalmente.
• O marcador de biotina permite uma detecção flexível com conjugados de estreptavidina-fluoróforo; certifique-se de que o reagente de detecção seja compatível com seu painel e com a configuração do laser.
• Ao realizar a marcação de macrófagos de camundongo, faça uma pré-incubação com um bloqueador de receptores Fc (por exemplo, anti-CD16/CD32) para reduzir a ligação inespecífica.
• F4/80 é uma proteína transmembrana grande; se as células forem fixadas e permeabilizadas, valide se o protocolo preserva o reconhecimento do epítopo de superfície.
• Como a expressão de F4/80 está ausente nos macrófagos das áreas de células T dos tecidos linfoides, inclua controles positivos adequados (por exemplo, macrófagos da polpa vermelha do baço) e controles negativos (por exemplo, zona de células T dos linfonodos).

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