Anticorpo Monoclonal Anti-IgM de Camundongo para WB, IHC-P, FC, ELISA - P01872

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Região Constante da Cadeia Pesada da IgM

• Identidade da Proteína e Isoformas: O alvo é a cadeia pesada constante mu da imunoglobulina (cadeia mu da Ig), codificada pelo gene Ighm (também conhecido como Igh-6). Ela constitui a região constante dos anticorpos IgM e existe tanto na forma secretada (sIgM) quanto na forma ligada à membrana (mIgM) através de splicing alternativo.
• Ligação a Antígenos e Montagem do Domínio Variável: Na imunidade humoral, os domínios variáveis de uma cadeia pesada e uma cadeia leve formam o sítio de ligação ao antígeno. Esses domínios são montados por rearranjo V-(D)-J e sofrem hipermutação somática para maturação de afinidade após exposição ao antígeno (Por similaridade).
• Multimerização e Polirreatividade da IgM Secretada: A sIgM se multimeriza em pentâmeros ou hexâmeros para ligação de alta avidez ao antígeno. A sIgM natural é polirreativa, reconhecendo estruturas conservadas do próprio organismo e de patógenos, enquanto a sIgM imune é antígeno-específica; ambas são essenciais para uma resposta humoral eficiente. Referências relacionadas: PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• Funções Efetoras via Receptores Fc e Complemento: As funções efetoras da sIgM são mediadas através do receptor Fc de alta afinidade FCMR em células linfoides, promovendo respostas de IgG e autotolerância, e pelo recrutamento de C1q para ativar a via clássica do complemento, facilitando a neutralização de patógenos e a fagocitose de células apoptóticas. Referências relacionadas: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• Imunidade Mucosa e Transcistose: Em superfícies mucosas, a sIgM é transportada através do epitélio pelo PIGR e secretada junto com o componente secretor. Complexos IgM-antígeno podem ser retro-transcistados via FCMR através de células M para tecidos linfoides. Referências relacionadas: PMID:34788614
• Sinalização do BCR de IgM Ligado à Membrana: Como parte do complexo do receptor de células B, a IgM ligada à membrana fornece sinalização tônica constitutiva necessária para a sobrevivência das células B e media a sinalização do pré-BCR que regula o rearranjo do gene da imunoglobulina e a exclusão alélica.
• Localização Subcelular e Expressão Tecidual: A proteína está localizada na membrana celular (como componente do BCR) e é secretada. É expressa na medula óssea e em células B-1 e B-2 no nível proteico.
• Modificações Pós-Traducionais e Palavras-Chave Estruturais: Caracterizada por ligações dissulfeto, glicosilação N-ligada, domínios de imunoglobulina e uma hélice transmembrana (na isoforma ligada à membrana). Palavras-chave: ligação dissulfeto, glicoproteína, domínio de imunoglobulina, membrana, secretada, transmembrana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 105-454 do Ighm de camundongo (P01872), correspondendo a uma região dentro do domínio constante. Este desenho pode visar epítopos conservados entre as isoformas secretada e ligada à membrana, potencialmente permitindo a detecção de ambas as formas.
• Para Western blotting (WB), o peso molecular previsto do alvo é de aproximadamente 50–53 kDa em condições redutoras. Considere o uso de controles apropriados, como lisados de baço de camundongo ou IgM purificada, e valide o padrão de bandas no seu sistema de amostra.
• Na imuno-histoquímica de tecidos incluídos em parafina (IHC-P), a recuperação de antígeno ideal e a diluição do anticorpo devem ser determinadas experimentalmente. O anticorpo é destinado ao uso em tecidos de camundongo; reatividade cruzada com outras espécies não foi relatada.
• Para citometria de fluxo (FC), garanta o bloqueio adequado do receptor Fc e use reagentes de detecção diretamente conjugados ou secundários compatíveis com o formato monoclonal de coelho. A pré-validação da coloração em populações de linfócitos B de camundongo (por exemplo, esplenócitos) é recomendada.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção de IgM de camundongo. Considere emparelhá-lo com um anticorpo de detecção apropriado para configurações de ELISA sanduíche e valide a sensibilidade e especificidade do ensaio.

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