Anticorpo Policlonal Anti-MRE11 para WB, IP, ELISA - P49959

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MRE11

• A MRE11 é um componente central do complexo MRN, essencial para o reparo de quebras de fita dupla, recombinação de DNA, manutenção de telômeros e meiose. Referências relacionadas: PMID:11741547, PMID:14657032, PMID:22078559
• O complexo MRN facilita o reparo por recombinação homóloga ao mediar a ressecção das extremidades do DNA. A MRE11 primeiro cliva a fita 5' endonucleoliticamente para prevenir NHEJ, depois gera DNA de fita simples 3' via atividade exonucleolítica, permitindo a ressecção de longo alcance por EXO1 e DNA2. Referências relacionadas: PMID:24316220, PMID:28867292
• A MRE11 possui atividades de endonuclease de fita simples e exonuclease 3'-5' específica de fita dupla. Sua atividade endonucleolítica é especificamente promovida por RBBP8/CtIP para limpar aductos proteína-DNA e gerar extremidades DSB limpas. Referências relacionadas: PMID:11741547, PMID:22078559, PMID:24316220, PMID:27814491, PMID:27889449, PMID:30787182
• O complexo MRN é necessário para a sinalização de danos no DNA através da ativação das quinases ATM e ATR, um papel independente da atividade nucleásica da MRE11. Referências relacionadas: PMID:14657032, PMID:15064416, PMID:15790808
• Nos telômeros, o complexo MRN pode modular a formação do t-loop, contribuindo para a integridade dos telômeros. Referências relacionadas: PMID:10888888
• O complexo MRN também está envolvido no processamento de R-loops e na ativação da via imune inata cGAS-STING durante a tumorigênese. Referências relacionadas: PMID:31537797
• A MRE11 contém dois domínios de ligação ao DNA, permitindo a ligação tanto a DNA de fita simples quanto de fita dupla.
• A MRE11 está sujeita a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e ubiquitinação, e mutações estão ligadas a variantes de doença e ciliopatia.
• A MRE11 localiza-se no núcleo, cromossomos e telômeros.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 290-485 do MRE11 humano, uma região central. Espera-se que este anticorpo policlonal detecte a MRE11 de comprimento total (81 kDa) em western blot desnaturante (WB). Otimize a diluição do anticorpo primário (por exemplo, 1:500-1:2000) para o seu sistema experimental.
• Para imunoprecipitação (IP), considere usar pelo menos 2-5 µg de anticorpo por 500 µg de lisado celular. Inclua controles positivos e negativos apropriados e valide a banda alvo por espectrometria de massa ou knockdown por siRNA, se necessário.
• Em aplicações de ELISA, faça a titulação do anticorpo contra o imunógeno ou proteína purificada para determinar a concentração de trabalho ideal. Confirme a especificidade testando contra antígenos não relacionados.
• Como a reatividade cruzada é relatada para humano e rato, valide o anticorpo na sua espécie e tecido de interesse usando controles positivos conhecidos por expressar MRE11.

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