Anticorpo Policlonal Anti-MSH2 para WB, IF/ICC, ELISA - P43246

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína de Reparo de Incompatibilidade de DNA Msh2

• Componente central do sistema de reparo de incompatibilidade de DNA (MMR) pós-replicativo. Forma dois heterodímeros: MutS alfa (com MSH6) e MutS beta (com MSH3), que se ligam ao DNA incompatível para iniciar o reparo.
• MutS alfa reconhece incompatibilidades de base única e pequenas alças de inserção-deleção (1–2 nucleotídeos), enquanto MutS beta reconhece alças maiores de até 13 nucleotídeos.
• Ao se ligar, os heterodímeros dobram o DNA, protegem aproximadamente 20 pares de bases e recrutam MutL alfa para coordenar a discriminação da fita, excisão e ressíntese.
• Recruta a DNA helicase MCM9 para a cromatina, facilitando o desenrolamento da fita contendo a incompatibilidade. Referências relacionadas: PMID:26300262
• A ligação e hidrólise de ATP atuam como um interruptor molecular: o DNA incompatível desencadeia a troca ADP→ATP, convertendo MutS alfa em uma braçadeira deslizante que difunde ao longo do DNA e permite eventos de reparo subsequentes.
• Também desempenha um papel no reparo por recombinação homóloga do DNA e, em melanócitos, pode modular a regulação do ciclo celular e a apoptose induzida por UV-B.
• A localização subcelular é predominantemente nuclear e associada aos cromossomos, consistente com sua função de vigilância genômica. Expresso de forma ubíqua em todos os tecidos.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação. Atua como um supressor de tumor; mutações estão associadas ao câncer colorretal hereditário não poliposo (HNPCC/Síndrome de Lynch).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 1–300 do terminal N do MSH2 humano. Como um anticorpo policlonal, ele reconhece múltiplos epítopos dentro desta região, o que pode fornecer detecção robusta, mas a consistência entre lotes deve ser verificada.
• O peso molecular esperado é de 105 kDa. Controles positivos adequados incluem linhagens celulares humanas comumente usadas (por exemplo, HeLa, HEK293) e tecidos de camundongo/rato, dada a expressão ubíqua do MSH2.
• Para Western blot (WB), protocolos padrão podem ser empregados; considere otimizar o bloqueio e a diluição do anticorpo para o tipo específico de amostra.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), espere marcação nuclear. Use métodos de fixação e permeabilização apropriados para preservar antígenos nucleares.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato permite estudos translacionais, mas a validação no sistema de amostra relevante é recomendada.

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