Anticorpo Monoclonal Anti-MSH6 para WB, IF/ICC, ELISA - P52701

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MSH6

• MSH6 codifica a proteína de reparo de desajuste de DNA Msh6, também conhecida como GTBP, GTMBP, homólogo 6 da proteína MutS e p160, um componente chave do sistema de reparo de desajuste pós-replicativo (MMR).
• Ela forma heterodímeros com MSH2 para gerar o complexo MutS alfa, que reconhece desajustes de base única e pequenos loops de inserção-deleção, iniciando o reparo do DNA.
• MutS alfa se liga ao DNA com desajuste, dobra a hélice, protege aproximadamente 20 pares de bases e recruta MutL alfa para direcionar eventos de reparo downstream, incluindo discriminação de fita, excisão e ressíntese.
• A ligação e hidrólise de ATP pela MSH6 atuam como um interruptor molecular: o DNA com desajuste desencadeia a troca ADP→ATP, induzindo uma mudança conformacional que converte MutS alfa em um clamp deslizante para difusão ao longo do DNA.
• O domínio PWWP da MSH6 liga especificamente a lisina 36 trimetilada da histona H3 (H3K36me3), mediando seu recrutamento para a cromatina na fase G1 e início da fase S para ligar a replicação do DNA ao reconhecimento de desajustes.
• Localizada no núcleo e nos cromossomos, MSH6 é fundamental para manter a estabilidade genômica; sua disfunção está associada à síndrome de Lynch (câncer colorretal hereditário não polipose) e outras neoplasias.
• A proteína tem massa molecular de aproximadamente 153 kDa, consistente com sua massa prevista de 152 786 Da, e sofre modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1–100) da MSH6 humana, que contém o domínio PWWP; considere que o epítopo pode ser mascarado pelas interações com H3K36me3 na cromatina fixada.
• Para Western blot, é esperada uma banda em torno de 153 kDa; devido ao grande tamanho, use géis de SDS-PAGE de baixa porcentagem e tempos de transferência estendidos.
• Em IF/ICC, é esperada coloração nuclear; a colocalização com marcadores de cromatina pode exigir otimização da permeabilização.
• Confirme a reatividade cruzada com amostras de camundongo e rato (validado para humano, camundongo e rato), mas verifique a homologia de sequência na região do imunógeno para outras espécies antes do uso.
• Aplicações em ELISA podem exigir emparelhamento com um anticorpo de detecção adequado; considere a cobertura direta do peptídeo sintético ou da MSH6 recombinante.

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