Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-MSH6 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P52701

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MSH6

• MSH6 codifica a proteína de reparo de incompatibilidade de DNA Msh6, também conhecida como GTBP, GTMBP ou p160, um componente crucial do sistema de reparo de incompatibilidade pós-replicativo (MMR).
• Msh6 heterodimeriza com MSH2 para formar MutS alfa, o complexo que reconhece incompatibilidades de base única e pequenas alças de inserção-deleção (IDLs) no DNA.
• Após a ligação à incompatibilidade, o MutS alfa sofre mudanças conformacionais dependentes de ATP, transformando-se em uma braçadeira deslizante que se difunde ao longo da cadeia de DNA para sinalizar o reparo.
• Recrutado para a cromatina nas fases G1 e S inicial através do seu domínio PWWP, que se liga ao 'Lis-36' trimetilado da histona H3 (H3K36me3), permitindo a rápida detecção de incompatibilidades durante a replicação.
• Localizado predominantemente no núcleo e nos cromossomos, consistente com seu papel na manutenção da integridade genômica.
• Mutações no MSH6 estão associadas à síndrome de Lynch (câncer colorretal hereditário não poliposo, HNPCC5) e a uma predisposição a vários tipos de câncer.
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, e splicing alternativo geram múltiplos isoformas que podem ajustar finamente a atividade do MMR.
• Além do reparo de incompatibilidade, o MutS alfa pode participar do reparo por recombinação homóloga do DNA, destacando seu papel multifacetado na manutenção do genoma.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-100) do MSH6 humano; esta sequência é conservada entre primatas e roedores, consistente com a reatividade cruzada observada.
• Para Western blotting, espera-se uma banda de aproximadamente 153 kDa; considere usar marcadores de peso molecular apropriados e verificar a especificidade com controles de knockout ou siRNA.
• Ao usar em imuno-histoquímica (IHC-P), teste métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor) e otimize as diluições de anticorpos em tecidos de controle positivo e negativo.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), avalie as condições de fixação e permeabilização; a localização nuclear do MSH6 deve ser proeminente, com possível associação à cromatina.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção; valide o emparelhamento com outros anticorpos MSH6 se estiver desenvolvendo um ensaio sanduíche.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar; a inclusão de um controle positivo (por exemplo, lisado de células HeLa) e um controle negativo (por exemplo, células knockout para MSH6) é recomendada para garantir a especificidade.

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