Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-mTOR para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P42345

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do mTOR

• O mTOR (alvo mecanístico da rapamicina) é uma proteína quinase de serina/treonina e um regulador central do metabolismo, crescimento e sobrevivência celulares em resposta a hormônios, fatores de crescimento, nutrientes, energia e sinais de estresse. Referências relacionadas: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926
• Ele atua em dois complexos distintos: o mTORC1, que promove processos anabólicos como a síntese de proteínas, lipídios e nucleotídeos e inibe a autofagia, e o mTORC2, que regula a proliferação celular, a organização do citoesqueleto e a lipogênese por meio da ativação de quinases AGC (por exemplo, AKT, PKC, SGK1). Referências relacionadas: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:18497260 PMID:21376236 PMID:24670654
• Ao fosforilar reguladores importantes, como EIF4EBP1 e RPS6KB1, o mTORC1 estimula a tradução de mRNA e a biogênese de ribossomos, além de promover a síntese de pirimidinas e lipídios. Referências relacionadas: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:24403073 PMID:29236692 PMID:23429703 PMID:23429704 PMID:23426360
• O mTORC1 suprime a autofagia por meio da fosforilação de ULK1, DAP, RUBCNL e AMBRA1 em condições ricas em nutrientes. Referências relacionadas: PMID:32561715 PMID:20537536 PMID:30704899 PMID:23524951 PMID:25438055
• A localização subcelular inclui lisossomos, retículo endoplasmático, aparelho de Golgi, membrana plasmática, membrana externa das mitocôndrias, citoplasma, núcleo e vesículas de fagossomos, refletindo suas diversas plataformas de sinalização.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação e ubiquitinação (ligação isopeptídica), com funções importantes na atividade quinase e no recrutamento para as membranas.
• É amplamente expresso, mas apresenta níveis mais elevados nos testículos; desempenha um papel regulador na função do relógio circadiano.
• As palavras-chave destacam seu envolvimento na sinalização de quinases, nas repetições TPR, em variantes associadas a doenças (epilepsia, deficiência intelectual) e no status de proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot, espera-se uma banda de alto peso molecular em torno de 289 kDa; considere utilizar um gel de SDS-PAGE de baixa porcentagem (por exemplo, 6%) e condições de transferência prolongadas para garantir uma detecção eficiente.
• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 2400–2500 da região C-terminal; verifique se o anticorpo reconhece sua isoforma-alvo ou a variante de splicing relevante.
• Na imunofluorescência/imuno-histoquímica, otimize os protocolos de permeabilização e fixação devido à presença do mTOR em organelas membranosas e corpos nucleares.
• Para imunoprecipitação, confirme a compatibilidade do anticorpo com seu tampão de lise e considere a sensibilidade dos complexos de mTOR aos detergentes.
• A reatividade cruzada com camundongo torna este anticorpo adequado para o estudo do mTOR em modelos comuns de roedores.

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