Anticorpo Monoclonal Anti-MUC1-C para WB, IHC-P, ELISA - P15941

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MUC1

• Mucina-1 (MUC1) é uma grande glicoproteína transmembrana também conhecida como antígeno associado ao carcinoma de mama DF3, antígeno de câncer 15-3 (CA 15-3), episialina e mucina epitelial polimórfica (PEM). Ela sofre clivagem autocatalítica nas subunidades alfa e beta.
• A subunidade alfa possui propriedades de adesão celular e pode atuar tanto como molécula de adesão quanto anti-adesão, potencialmente fornecendo uma camada protetora nas células epiteliais contra ataques bacterianos e enzimáticos.
• A subunidade beta contém um domínio C-terminal envolvido na sinalização celular, modulando vias como ERK, SRC e NF-kappa-B, e promovendo a progressão tumoral.
• Em células T ativadas, o MUC1 influencia a via Ras/MAPK, e regula a transcrição mediada por TP53 ao se ligar, juntamente com o KLF4, ao elemento promotor PE21 do TP53, reprimindo assim a atividade do TP53 e determinando o destino celular na resposta ao estresse genotóxico.
• A localização subcelular inclui a membrana celular apical, formas secretadas, citoplasma e núcleo, refletindo suas funções de clivagem e sinalização.
• Expressão tecidual: expresso constitutivamente na superfície apical de células epiteliais nas vias aéreas, mama e útero; também expresso em células T ativadas e não ativadas. Superexpresso em tumores epiteliais como câncer de mama e ovário, e a isoforma Y é expressa apenas em células tumorais.
• Modificações pós-traducionais incluem extensa glicosilação N- e O-ligada, fosforilação e palmitoilação, contribuindo para sua diversidade estrutural e de sinalização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde ao domínio citoplasmático C-terminal (aminoácidos 1156–1255), sugerindo que o anticorpo reconhece a subunidade beta do MUC1 (MUC1-C) e pode detectar formas de comprimento total e clivadas.
• Para WB, considere que o peso molecular previsto é de 122 kDa, mas devido à intensa glicosilação e clivagem, a banda observada pode aparecer em pesos moleculares mais altos ou como múltiplas bandas; condições redutoras e porcentagem de gel apropriada (ex.: 6–8%) são recomendadas.
• Para IHC-P, a recuperação antigênica (ex.: recuperação de epítopo induzida por calor em tampão citrato) pode ser necessária; valide em tecidos positivos conhecidos, como carcinoma de mama ou ovário.
• Para ELISA, otimize o antígeno de revestimento e a concentração de anticorpo usando MUC1-C recombinante ou lisados celulares; a reatividade cruzada com camundongo e rato permite estudos translacionais.

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