Anticorpo Monoclonal Anti-MUC4 para WB, IHC-P, ELISA - Q99102

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MUC4

• A MUC4 é uma glicoproteína transmembranar de alto peso molecular (542 kDa) pertencente à família das mucinas, caracterizada por extensa O-glicosilação e um grande domínio extracelular com repetições semelhantes a EGF.
• Ela é um componente principal da camada de muco, fornece uma barreira protetora nas superfícies epiteliais e contribui para a renovação e diferenciação das células epiteliais. Referências relacionadas: PMID:10880978
• A MUC4 funciona como ligante intramembranar para o receptor tirosina quinase ERBB2, induzindo a fosforilação de ERBB2 e modulando vias de sinalização downstream para influenciar a proliferação celular, diferenciação e apoptose; ela pode formar complexos com ERBB3 e NRG1 que reprimem a apoptose e promovem o crescimento tumoral. Referências relacionadas: PMID:10880978
• A proteína sofre splicing alternativo, contém pontes dissulfeto, domínios semelhantes a EGF e uma hélice transmembranar; é anotada com palavras-chave como glicoproteína, adesão celular e secretada (referindo-se ao seu ectodomínio solto).
• A localização subcelular inclui a membrana celular como proteína de membrana tipo I, mas o ectodomínio pode ser clivado e secretado; ele é encontrado nas frações de membrana e secretada.
• A expressão tecidual é ampla: expressão normal no timo, tireoide, pulmão, traqueia, esôfago, estômago, intestino delgado, cólon, testículo, próstata, ovário, útero, placenta, glândulas mamárias e salivares; é superexpressada em múltiplos carcinomas, incluindo cânceres pancreático, pulmonar, de mama, biliar, de cólon e cervical, sendo mínima no pâncreas normal.
• Dado seu papel na modulação da adesão celular e interação com ERBB2, a MUC4 está implicada na transição epitelial-mesenquimal e progressão do câncer, tornando-se um marcador valioso na pesquisa em oncologia.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região da porção C-terminal da MUC4 (aminoácidos 4807-4916), que faz parte do domínio extracelular. Esta região pode ser menos glicosilada do que a região de repetição em tandem, oferecendo potencialmente maior especificidade na detecção da proteína core.
• Dado o grande tamanho da MUC4 (542 kDa), considere usar SDS-PAGE de baixa porcentagem (ex: 4-6%) para western blot para aumentar a eficiência de transferência. Tempos de transferência estendidos e baixa tensão podem melhorar a detecção.
• Para IHC-P, métodos de recuperação de antígeno (como recuperação de epítopo induzida por calor em tampão de citrato, pH 6,0) podem ser necessários; recomenda-se a validação em controles de tecido positivos e negativos conhecidos (ex: tumor pancreático vs. pâncreas normal).
• Foi comprovada a reatividade cruzada com rato; a validação em amostras de rato deve ser realizada para confirmar a adequação para estudos em roedores.
• Devido ao alto peso molecular e glicosilação intensa, a preparação do lisado pode exigir sonicação e uso de condições desnaturantes para garantir a solubilidade.

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