mAb de coelho anti-mieloperoxidase (MPO) para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P05164

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da mieloperoxidase (MPO)

• A mieloperoxidase é uma proteína heme contendo ferro, expressa especificamente em neutrófilos e monócitos. É sintetizada como um precursor e processada em cadeias leve e pesada.
• Participa da formação de armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs): transloca-se para o núcleo, liga-se aos nucleossomos e promove a descondensação da cromatina e a extrusão de DNA, aprisionando patógenos. Referências relacionadas: PMID:40963017
• Atua como uma peroxidase para produzir ácido hipocloroso (HOCl) e outros ácidos hipohalosos (HOBr, HOI, HOSCN) na presença de H₂O₂, aumentando assim a atividade microbicida. Referências relacionadas: PMID:16125131, PMID:17074761, PMID:17438335, PMID:1318692
• Catalisa a oxidação do nitrito em radical dióxido de nitrogênio e gera espécies reativas que cloram e nitrificam resíduos de proteínas (por exemplo, APOA1), prejudicando o transporte de colesterol. Referências relacionadas: PMID:10777476, PMID:8385644, PMID:9450756, PMID:15314690, PMID:15326314, PMID:15498770, PMID:15574409
• Oxida a melatonina e o urato, atua como uma oxidase de óxido nítrico que regula o tônus vascular e cliva a alfa-1-microglobulina para produzir uma forma que inibe a oxidação de LDL. Referências relacionadas: PMID:15636586, PMID:16148002, PMID:21266577, PMID:12089442, PMID:25698971
• A atividade peroxidase é inibida pelo inibidor de peroxidase SPIN de S. aureus, que bloqueia o acesso do substrato ao heme catalítico.
• Localiza-se principalmente nos lisossomos e nos grânulos citoplasmáticos dos neutrófilos; após a ativação, é secretada ou translocada para o núcleo e pode associar-se aos cromossomos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para WB, o peso molecular previsto é de 84 kDa; valide com controles positivos apropriados, como lisados de neutrófilos ou monócitos. Confirme o padrão de bandas esperado, levando em consideração as cadeias precursoras e processadas.
• Para IHC-P, pode ser necessária a recuperação antigênica; otimize utilizando cortes FFPE de tecidos ricos em neutrófilos, como medula óssea ou tecido inflamado.
• Para IF/ICC, considere protocolos de permeabilização para acessar a MPO granular e nuclear intracelular; utilize um bloqueio apropriado para reduzir a ligação inespecífica.
• Inclua controles negativos apropriados e considere testar a reatividade cruzada em amostras de camundongo e rato, conforme indicado.
• O desempenho no ELISA deve ser validado com MPO recombinante ou proteína nativa em fluidos biológicos relevantes.

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