Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Mieloperoxidase (Mpo) para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P11247

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Mieloperoxidase (Mpo)

• A mieloperoxidase (Mpo) é uma peroxidase contendo heme e ferro, altamente expressa nos grânulos azurofílicos dos neutrófilos, funcionando como um homodímero de cadeias pesada e leve glicosiladas, ligadas por pontes dissulfeto.
• Como efetora essencial da imunidade inata, a Mpo catalisa a conversão de peróxido de hidrogênio e íons cloreto em ácido hipocloroso (HOCl), um potente oxidante microbicida.
  Referências relacionadas: PMID:11593004
• A Mpo é fundamental para a formação de armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs), um processo no qual ela se transloca para o núcleo, desorganiza os nucleossomos e promove a descondensação da cromatina para formar redes extracelulares de DNA que aprisionam patógenos.
  Referências relacionadas: PMID:10085024, PMID:23306200
• A atividade microbicida direta da Mpo é ampliada por sua capacidade de oxidar vários substratos, gerando espécies reativas adicionais, como ácido hipobromoso, radical dióxido de nitrogênio e radicais tirosila de proteínas.
• A Mpo é uma proteína distribuída em vários compartimentos: armazenada nos grânulos azurofílicos citoplasmáticos, translocada para os fagossomos após uma infecção e secretada ativamente; durante a NETose, localiza-se no núcleo e nos cromossomos.
• A atividade da enzima depende de cálcio, e sua forma madura é estabilizada por pontes dissulfeto intr cadeia, com modificações pós-traducionais, incluindo a N-glicosilação, essenciais para o dobramento e a atividade adequados.
• Além disso, a Mpo contribui para danos inflamatórios aos tecidos ao clorar e nitrar proteínas do hospedeiro, como a apolipoproteína A-I, prejudicando assim o efluxo de colesterol e promovendo a aterosclerose.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno, uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 16–718 da Mpo de camundongo, cobre quase toda a sequência precursora (excluindo o peptídeo sinal), sugerindo que o anticorpo pode reconhecer tanto a proenzima quanto as cadeias pesada e leve processadas.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 81 kDa para o precursor; em condições redutoras, as cadeias pesada (aproximadamente 60 kDa) e leve (aproximadamente 15 kDa) também podem ser detectadas, dependendo do processamento da amostra e do tipo celular.
• Para imunofluorescência e imuno-histoquímica, considere otimizar os protocolos de permeabilização e recuperação antigênica para detectar a Mpo nos grânulos azurofílicos (citoplasmáticos), fagossomos ou durante a NETose, quando ocorre a localização nuclear.
• O anticorpo é validado para ELISA; assegure condições adequadas de revestimento e inclua etapas apropriadas de bloqueio e lavagem para minimizar o background.
• A reatividade cruzada com a Mpo humana e de rato foi demonstrada, mas a intensidade do sinal pode variar; valide séries de diluição na espécie e no contexto tecidual relevantes.

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