Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-N4BP1 para WB, IF/ICC, ELISA - O75113

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da N4BP1

• A N4BP1 (proteína 1 de ligação a NEDD4) é um potente supressor da produção de citocinas e um regulador negativo chave da sinalização imune inata, limitando as respostas inflamatórias a estímulos menores de TLR.
• Atua como um fator de restrição contra o HIV-1 ligando-se a mRNAs virais e degradando-os por meio de sua atividade ribonuclease intrínseca. Referências relacionadas: PMID:31133753
• Após a infecção por patógenos mais ameaçadores, a N4BP1 é clivada pela CASP8 a jusante do TLR3 ou TLR4, levando à sua inativação e permitindo a produção total de citocinas.
• Inibe a ligase de ubiquitina-proteína E3 ITCH competindo pela ligação ao substrato via o segundo domínio WW da ITCH, prejudicando a ubiquitinação.
• Localiza-se no citoplasma, citosol, núcleo, nucléolo e corpos nucleares PML, indicando distribuição celular multifuncional.
• Detectada em uma ampla gama de tecidos, incluindo coração, pulmão, cérebro, fígado, músculo esquelético, pâncreas, rim, baço, testículo e ovário.
• Palavras-chave do UniProt destacam seus papéis como hidrolase, nuclease, proteína de ligação a RNA e fosfoproteína envolvida na imunidade inata.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 190–590 da N4BP1 de camundongo, uma região contendo o domínio NYN (RNase) e parte da região de interação com a ITCH. Este projeto visa produzir um anticorpo que reconheça a N4BP1 de comprimento total em condições desnaturantes e nativas.
• Para Western blot, considere um intervalo de diluição inicial de 1:500–1:2000 e valide com controles positivos relevantes (por exemplo, lisados de células humanas ou de camundongo conhecidos por expressar N4BP1).
• Em imunofluorescência/ICC, confirme a localização nuclear e citoplasmática com protocolos apropriados de fixação e permeabilização; a inclusão de marcadores de corpos PML pode auxiliar em estudos de co-localização.
• O anticorpo é validado para ELISA, potencialmente adequado para captura ou detecção em ensaios sanduíche; otimize as condições de revestimento e detecção para o seu formato de imunoensaio específico.
• A reatividade cruzada com N4BP1 humano e de camundongo é especificada; no entanto, verifique a especificidade no seu sistema experimental, especialmente se trabalhar com amostras de outras espécies.

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