Anticorpo Policlonais Anti-NADPH oxidase 4 (NOX4) para WB, IHC-P, ELISA - Q9NPH5

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NOX4

• A NADPH oxidase 4 (NOX4) é uma proteína de membrana multipasse pertencente à família das NADPH oxidases. Também é conhecida como oxidase renal-1 (KOX-1) e NAD(P)H-oxidase renal, com splicing alternativo que produz múltiplas isoformas.
• O NOX4 catalisa principalmente a redução do oxigênio a peróxido de hidrogênio (H2O2), e em menor grau, a superóxido, usando NADPH como doador de elétrons. Ele atua como um sensor de oxigênio, regulando a atividade do canal de potássio KCNK3/TASK-1 e do HIF1A, e modula a sinalização da insulina. Referências relacionadas: PMID:14966267, PMID:15356101, PMID:15927447, PMID:10869423, PMID:11032835, PMID:15155719, PMID:16019190
• O NOX4 também contribui para a apoptose, reabsorção óssea e ativação do NF-kB mediada por lipopolissacarídeo. No núcleo, ele gera superóxido, influenciando a expressão gênica e promovendo a ferroptose através da ativação do inflamassomo NLRP3 e liberação de citocinas. Referências relacionadas: PMID:15356101, PMID:15572675, PMID:16324151, PMID:39909992
• Uma isoforma adicional ou atividade dependente do contexto envolve a geração direta de superóxido, desempenhando um papel chave na sinalização redox vascular, ativação nuclear de ERK1/2 e indução de danos no DNA. Referências relacionadas: PMID:15721269, PMID:23393389
• Algumas variantes de splicing não possuem atividade de NADPH oxidase geradora de superóxido, indicando diversidade funcional dentro da família.
• Subcelularmente, o NOX4 se localiza na membrana do retículo endoplasmático, citoplasma, membrana celular, adesões focais, núcleo (incluindo o nucléolo) e região perinuclear, refletindo seus papéis multifacetados na sinalização.
• A expressão tecidual é ampla, com forte presença no rim (células tubulares distais), coração, células endoteliais, músculo esquelético, cérebro, adipócitos e células epiteliais das vias aéreas, conforme evidenciado por dados de mRNA e proteína.
• As modificações pós-tradução incluem glicosilação e pontes dissulfeto, consistentes com sua topologia transmembrana e tráfego subcelular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região dentro dos aminoácidos 328–578 do NOX4 humano; certifique-se de que o seu sistema de amostra expressa a isoforma completa ou relevante que contém esse epítopo.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda de aproximadamente 67 kDa; use marcadores de peso molecular e valide a especificidade da banda com lisados de controle de knockout (KO) quando disponíveis.
• Na imunohistoquímica de seções embebidas em parafina (IHC-P), pode ser necessária a otimização da recuperação de antígeno, e seções de tecido renal servem como controle positivo devido à alta expressão de NOX4.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com NOX4 de camundongo e rato, sendo adequado para estudos em modelos de roedores; no entanto, confirme a reatividade nas suas condições experimentais específicas.
• Para aplicações de ELISA, considere o pareamento com um anticorpo de captura contra um epítopo diferente para evitar impedimento estérico, se estiver usando o formato sanduíche.

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