Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-NAGA para WB, IF/ICC, ELISA - P17050

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Alfa-N-acetilgalactosaminidase (NAGA)

• O gene NAGA codifica a alfa-N-acetilgalactosaminidase, também conhecida como alfa-galactosidase B, uma glicosidase lisossomal.
• Ela catalisa a remoção de resíduos terminais de alfa-N-acetilgalactosamina de glicolipídios e glicopeptídeos, etapa essencial para o catabolismo de glicolipídios.
• A enzima está localizada no lisossomo, onde participa da degradação de glicoconjugados.
• As modificações pós-traducionais incluem N-glicosilação (glicoproteína), fosforilação (fosfoproteína), além da presença de peptídeo sinal e pontes dissulfeto, conforme indicado pelas palavras-chave do UniProt.
• Mutações em NAGA estão associadas a doenças, conforme observado pela palavra-chave 'Variante associada a doença', embora os fenótipos específicos possam variar; a epilepsia está listada entre as palavras-chave associadas.
• A proteína tem um peso molecular calculado de aproximadamente 46,6 kDa (UniProt), enquanto o produto de anticorpo alvo uma banda de 47 kDa, consistente com a forma madura glicosilada.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi projetado usando um fragmento recombinante correspondente aos aminoácidos 312–411 próximo ao C-terminal da NAGA humana (NP_000253.1). Esta região pode estar exposta na superfície da proteína, permitindo potencialmente o reconhecimento tanto da proteína nativa quanto da desnaturada.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda em torno de 47 kDa; considere usar um lisado de controle positivo de tecidos ou células conhecidos por expressar NAGA, como amostras ricas em lisossomos.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), a co-coloração com um marcador lisossomal é recomendada para confirmar a localização lisossomal.
• A reatividade cruzada do anticorpo com amostras de camundongo e rato sugere reconhecimento de epítopo conservado; no entanto, o alinhamento de sequência é aconselhado para verificar a conservação do epítopo se comparações quantitativas entre espécies forem pretendidas.
• Para aplicações em ELISA, otimize as condições de revestimento e use uma proteína ou peptídeo recombinante de NAGA como curva padrão para garantir a precisão quantitativa.

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