Anticorpo policlonal de coelho anti-NANOG para WB, ELISA - Q80Z64

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de NANOG

• A proteína homeobox NANOG, também conhecida como proteína 4 associada às células ES, é um regulador transcricional essencial para a proliferação e a autorrenovação da massa celular interna e das células-tronco embrionárias (ES). Referências relacionadas: PMID:25825768
• Confere pluripotência às células ES e impede sua diferenciação em direção às linhagens de endoderma extraembrionário e trofectoderma.
• Bloqueia a diferenciação mesodérmica de células ES induzida pela proteína morfogenética óssea ao interagir fisicamente com SMAD1 e interferir no recrutamento de coativadores.
• Liga-se preferencialmente à sequência consenso de DNA 5'-TAAT[GT][GT]-3' ou 5'-[CG][GA][CG]C[GC]ATTAN[GC]-3' e pode atuar tanto como ativador quanto como repressor transcricional.
• É capaz de autorreprimir sua expressão em células ES em diferenciação ao se ligar ao seu próprio promotor após interagir com ZNF281/ZFP281, levando ao recrutamento do complexo NuRD.
• Localiza-se no núcleo e não é expressa, em nível proteico, em muitos órgãos somáticos, oócitos, espermatogônias ou linhagens celulares hematopoiéticas.
• O splicing alternativo produz múltiplas isoformas, e a proteína possui um domínio homeobox de ligação ao DNA; as palavras-chave associadas incluem proteína do desenvolvimento, ativador, repressor e ligação ao DNA.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 160-305 de NANOG de camundongo, uma região que pode contribuir para a reatividade cruzada humana observada; considere o alinhamento das sequências de NANOG de camundongo e humano para avaliar a conservação dos epítopos.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 34 kDa; inclua controles positivos apropriados, como lisados de células-tronco embrionárias de camundongo, e valide a especificidade da detecção utilizando amostras com knockdown ou knockout, se disponíveis.
• Em aplicações de ELISA, utilize proteína NANOG recombinante ou extratos celulares como antígenos de revestimento e determine empiricamente as diluições ideais do anticorpo; a reatividade cruzada com NANOG humano permite o uso potencial em testes de amostras humanas, mediante validação apropriada.

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