Anticorpo Monoclonal Anti-Nav1.5/SCN5A para WB, IHC-P, ELISA - Q14524

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de Nav1.5/SCN5A

• Nav1.5 (SCN5A) é a subunidade alfa formadora do poro do canal de sódio dependente de voltagem Nav1.5, responsável pela fase despolarizante dos potenciais de ação em membranas excitáveis. Referências relacionadas: PMID:33712541 PMID:40768348
• Nav1.5 é o principal canal de sódio em células miocárdicas, mediando a subida inicial do potencial de ação cardíaco e iniciando o batimento cardíaco. Referências relacionadas: PMID:11234013 PMID:11804990 PMID:12569159
• Permite o influxo seletivo de íons Na+ após despolarização da membrana, propagando sinais elétricos por todo o tecido cardíaco. Referências relacionadas: PMID:1309946 PMID:21447824 PMID:23085483
• Necessário para a condução elétrica normal e configuração do potencial de ação, parcialmente através da interação com XIRP2 (Por similaridade).
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas; a isoforma 4 é expressa no cérebro, enquanto o canal de comprimento total é específico do coração.
• Localiza-se no sarcolema, nos túbulos T e no citoplasma perinuclear em cardiomiócitos, garantindo transmissão rápida do impulso.
• Mutações no SCN5A causam síndromes de arritmia cardíaca, como síndrome do QT longo tipo 3 (LQT3), síndrome de Brugada e fibrilação atrial.
• Sofre fosforilação, metilação, ubiquitinação e glicosilação, que modulam o tráfego e a função do canal.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western Blotting (WB), considere usar géis de SDS-PAGE a 6-8% e tempos de transferência prolongados (ex.: 2-3 horas a 100 V) devido ao alto peso molecular do Nav1.5 (221-227 kDa). Inclua um marcador de peso molecular de alta faixa para confirmação precisa do tamanho.
• Para Imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação antigênica com tampão citrato (pH 6.0) ou EDTA (pH 9.0) pode melhorar a exposição do epítopo; valide com controles de tecido positivo (músculo cardíaco) e negativo (ex.: fígado) apropriados.
• O imunógeno (aa 273-357) reside em uma alça intracelular; portanto, etapas de permeabilização (ex.: Triton X-100 a 0,1%) são recomendadas para imunofluorescência ou protocolos de coloração que requerem acesso a epítopos citoplasmáticos.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção para Nav1.5 em lisados celulares ou de tecido; emparelhar com outro clone ou um anticorpo policlonal pode aumentar a sensibilidade.
• Como o anticorpo reage de forma cruzada com Nav1.5 de camundongo e rato, é adequado para estudos comparativos entre espécies; no entanto, verifique a especificidade na espécie de interesse usando linhagens celulares knockout ou knockdown por siRNA, se possível.

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