Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NCAPH para WB, IF/ICC, ELISA - Q15003

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NCAPH

• NCAPH codifica a subunidade 2 regulatória do complexo condensina (também conhecida como hCAP-H, CAP-H, BRRN1), essencial para a condensação e segregação cromossômica mitótica.
• O complexo condensina, contendo NCAPH, introduz superenrolamentos positivos no DNA e coopera com topoisomerases para compactar a cromatina em cromossomos mitóticos (PubMed:11136719). Referências relacionadas: PMID:11136719
• Em células-tronco neurais, a NCAPH garante uma condensação cromossômica precisa durante a neurogênese precoce, e mutações de perda de função levam à microcefalia primária tipo 23 (MCPH23) via redução na produção de neurônios (PubMed:27737959). Referências relacionadas: PMID:27737959
• Subcelularmente, a NCAPH localiza-se no citoplasma e núcleo, e associa-se aos cromossomos especificamente durante a mitose.
• A proteína está sujeita a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação (formação de ligação isopeptídica), provavelmente regulando suas funções mitóticas.
• A NCAPH é amplamente expressa em baixos níveis entre os tecidos, com maior expressão em células proliferantes, consistente com seu papel na divisão celular.
• O splicing alternativo do gene NCAPH produz múltiplas variantes de transcrito, potencialmente gerando isoformas com diferenças funcionais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 1‑250 (região N‑terminal) da NCAPH humana; considere que o anticorpo reconhece epítopos dentro deste domínio e pode detectar isoformas contendo esta sequência.
• Para Western blotting (WB), é esperada uma banda em torno de 83 kDa em lisados de células humanas; valide em um sistema de amostra relevante (ex.: HeLa, HEK293) e otimize as condições de carga e transferência.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), a NCAPH exibe coloração nuclear e citoplasmática; use protocolos de fixação/permeabilização apropriados para preservar a acessibilidade do epítopo e verifique a co‑localização com cromossomos mitóticos.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de detecção; combine com um anticorpo de captura adequado se desenvolver um ensaio sanduíche e teste usando proteína NCAPH recombinante ou lisados celulares.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes e a reatividade cruzada com subunidades da condensina intimamente relacionadas podem variar; confirme a especificidade na sua aplicação por meio de controles de knockdown/knockout ou comparando com padrões de expressão conhecidos.

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