Anticorpo Policlonal Anti-NCF4/p40-phox para WB, ELISA - Q15080

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NCF4/p40-phox

• NCF4 (Fator citosólico de neutrófilos 4), também conhecido como p40-phox, SH3PXD4 ou NCF, é uma proteína de 39032 Da codificada pelo gene NCF4 no cromossomo 22 humano. É predominantemente expresso em células hematopoiéticas.
• p40-phox é uma subunidade reguladora do complexo oxidase de NADPH de fagócitos, que gera o ânion superóxido (O2(-)) transferindo elétrons do NADPH citosólico para o oxigênio molecular, crucial para a morte microbiana em fagócitos.
• A ativação da oxidase de NADPH envolve a montagem de subunidades citosólicas (incluindo p40-phox, p47-phox, p67-phox) com o flavocitocromo de membrana b558 (gp91-phox e p22-phox) upon cell stimulation.
• p40-phox contém um domínio PX na extremidade N-terminal que se liga ao fosfatidilinositol 3-fosfato e um domínio SH3 na extremidade C-terminal, mediando interações proteína-lipídeo e proteína-proteína essenciais para a ativação da oxidase e direcionamento à membrana.
• Subcelularmente, p40-phox é encontrado no citosol de células em repouso e transloca para as membranas endossomal e fagossomal durante a ativação, facilitando a produção localizada de ROS.
• O splicing alternativo produz isoformas, e mutações no NCF4 estão associadas à doença granulomatosa crônica autossômica recessiva (CGD), caracterizada por infecções recorrentes.
• A proteína é fosforilada em resíduos específicos em resposta a estímulos como éster de forbol, aumentando sua afinidade de ligação às membranas e contribuindo para a montagem do complexo oxidase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 1-190 do NCF4/p40-phox humano (NP_038202.2), abrangendo o domínio PX. Valide a especificidade do anticorpo para a aplicação pretendida no sistema de amostra relevante.
• Para Western blot (WB), o NCF4/p40-phox tem um peso molecular previsto de aproximadamente 39 kDa. Confirme os padrões de migração usando controles positivos apropriados e considere possíveis modificações pós-traducionais.
• O anticorpo também é adequado para ELISA, provavelmente reconhecendo a proteína nativa. A titulação e otimização são recomendadas para cada configuração experimental.
• Como a reatividade cruzada é relatada para humano, camundongo e rato, considere este anticorpo para detectar p40-phox nessas espécies, mas verifique a reatividade em seus modelos específicos.

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