Anticorpo Monoclonal Anti-NCK1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16333

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NCK1

• O NCK1 é uma proteína adaptadora SH2/SH3, também conhecida como NCK, nck-1 ou NCKalpha, codificada pelo gene NCK1; o splicing alternativo produz múltiplas isoformas.
• Associa-se a receptores de fatores de crescimento fosforilados em tirosina (por exemplo, KDR, PDGFRB) e seus substratos, ligando a ativação do receptor a cascatas de sinalização a jusante.
• O NCK1 mantém níveis baixos de fosforilação de EIF2S1 promovendo sua desfosforilação pela proteína fosfatase 1 (PP1), regulando assim o início da tradução.
• Participa da resposta a danos no DNA, facilitando a ativação eficiente de efetores a jusante como CHEK2, a jusante dos sensores de danos ATM/ATR.
• A proteína modula a ativação de EIF2AK2/PKR por RNA de fita dupla, influenciando a resposta ao estresse integrada.
• O NCK1 interage com receptores de efrina, potencialmente contribuindo para processos de adesão e migração celular.
• A localização subcelular inclui o citoplasma, o retículo endoplasmático e o núcleo, consistente com seus papéis na transdução de sinais e expressão gênica.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem modular suas interações e funções; a proteína tem um peso molecular calculado de ~43kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético dos aminoácidos 200-300 do NCK1 humano; considere usar um controle positivo expressando a proteína NCK1 de comprimento total para validação.
• Para Western blot, detecte uma banda em aproximadamente 43kDa em lisados de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato; valide a especificidade com bloqueio de peptídeo ou controles de knockdown/knockout.
• Em imuno-histoquímica (seções embebidas em parafina), a recuperação de antígeno pode ser necessária; otimize as condições de coloração para cada tipo de tecido.
• Para imunofluorescência/ICC, as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas para preservar a acessibilidade do epítopo e a arquitetura celular.
• Aplicações de ELISA podem se beneficiar do emparelhamento com um anticorpo de detecção adequado; considere titulações em tabuleiro (checkerboard) para uma relação ideal sinal-ruído.

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