Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NDST1 para WB, ELISA - P52848

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NDST1

• A NDST1 é a enzima bifuncional essencial que inicia a modificação do heparan sulfato catalisando sequencialmente a N-desacetilação e N-sulfatação de resíduos de glicosamina, produzindo o heparosano N-sulfatado necessário para a biossíntese subsequente de heparina e heparan sulfato. Referências relacionadas: PMID:35137078, PMID:9230113, PMID:9744796
• Esta etapa enzimática é limitante da taxa e determina o padrão final de sulfatação do heparan sulfato, que por sua vez determina sua capacidade de interagir com proteínas como a L-selectina, participando assim na adesão e tráfego de células inflamatórias.
• A atividade da NDST1 é necessária para a secreção exossomal da sindecana, SDCBP (sintenina) e CD63, destacando uma função não canônica na biogênese ou liberação de vesículas extracelulares. Referências relacionadas: PMID:22660413
• Um isoformo derivado de splicing alternativo (isoforma 2) carece de ambas as atividades catalíticas e funciona como um regulador dominante-negativo, potencialmente alterando a estequiometria dos complexos enzimáticos biossintéticos.
• Subcelularmente, a NDST1 é uma proteína de membrana integral do aparelho de Golgi, com dupla localização nas membranas do cis-Golgi e da rede trans-Golgi.
• A proteína é amplamente expressa em vários tecidos, mas é particularmente abundante no coração, fígado e pâncreas, consistente com sistemas orgânicos que requerem extensa biossíntese de heparan sulfato.
• A NDST1 está sujeita a glicosilação e formação de ligações dissulfeto; mutações no gene NDST1 estão associadas a deficiência intelectual, sublinhando seu papel crítico no desenvolvimento.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio (aa 40–170) abrange a região N-terminal compartilhada pela isoforma 1 e pela isoforma dominante-negativa 2; portanto, o anticorpo pode reconhecer ambas as variantes de splicing e deve ser validado no sistema de amostra relevante.
• No Western blot, a proteína NDST1 madura migra com um peso molecular aparente de ~101 kDa; deslocamentos de banda ou múltiplas bandas podem surgir de glicosilação ou complexos com ligações dissulfeto, portanto, é aconselhável usar condições redutoras e controles positivos apropriados.
• Para ELISA, este anticorpo policlonal pode servir como reagente de captura ou detecção; os usuários finais devem realizar titulações em "tabuleiro de xadrez" com seu antigénio alvo específico (proteína recombinante ou lisado celular) para otimizar o desempenho.
• Como é relatada reatividade cruzada com NDST1 de rato, o anticorpo é adequado para estudos em ratos; no entanto, confirme a conservação do epítopo por alinhamento de sequência e experimentos piloto em amostras derivadas de rato.

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