Anticorpo Policlonal Anti-NDUFS3 para WB e ELISA - O75489

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NDUFS3

• O NDUFS3 é uma proteína ferro-enxofre de 30 kDa que serve como uma subunidade central do Complexo I mitocondrial (NADH:ubiquinona oxidorredutase).
• É essencial para a atividade catalítica do Complexo I, facilitando a transferência de elétrons do NADH para a ubiquinona e contribuindo para o translocamento de prótons através da membrana interna. Referências relacionadas: PMID:14729820, PMID:30140060
• O NDUFS3 desempenha um papel crucial na montagem e estabilização da holoenzima do Complexo I; mutações neste gene causam deficiência do complexo I mitocondrial (MC1DN8). Referências relacionadas: PMID:24028823
• A proteína é sintetizada como um precursor com uma sequência de direcionamento mitocondrial N-terminal, que é clivada durante a importação para o mitocôndria.
• Localiza-se na membrana interna mitocondrial, onde se integra ao braço de membrana do Complexo I.
• O splicing alternativo do gene NDUFS3 produz múltiplas variantes de transcrição, potencialmente regulando a expressão ou função da proteína.
• Como parte da cadeia respiratória, o NDUFS3 é ubiquamente expresso, mas é particularmente abundante em tecidos com alta demanda energética.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região comum ao NDUFS3 humano (aa 37-264), que é altamente conservada em camundongos, apoiando as reivindicações de reatividade cruzada na ficha técnica. Os pesquisadores devem validar a reatividade específica da espécie em seu próprio sistema experimental.
• Para Western blotting, use lisatos enriquecidos em mitocôndrias ou lisatos de células inteiras de tecidos com alto conteúdo mitocondrial (por exemplo, coração, fígado) para melhorar a detecção da banda de ~30 kDa.
• Em aplicações de ELISA, considere usar o mesmo fragmento de proteína recombinante como antígeno de revestimento para a detecção quantitativa de anticorpos específicos para NDUFS3.
• Inclua controles apropriados: um controle positivo, como um lisado de tecido humano ou de camundongo conhecido por expressar NDUFS3, e um controle negativo (por exemplo, amostra com knockout ou depleção de NDUFS3) para confirmar a especificidade.
• Otimize empiricamente a diluição do anticorpo e as condições de incubação para cada aplicação, pois os anticorpos policlonais podem apresentar variabilidade de lote para lote.

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