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Anticorpo monoclonal anti-NEDD4 para WB, ELISA - P46934

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Anticorpo monoclonal anti-NEDD4 para WB, ELISA - P46934

Número do item : CM0010266

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Aplicação
WB, ELISA
Reatividade Cruzada
Humano
Peso da Proteína
149kDa
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Parâmetro Valor
Nome do produto mAb de coelho anti-NEDD4
Observações/Apelido RPF1; NEDD4-1; NEDD4
Espécie Humana
GeneID (Humano) 4734
GeneID 4734
Imunógeno Peptídeo sintético
Origem Coelho
Categoria Anticorpos monoclonais
Aplicação WB, ELISA
Reatividade cruzada Humana
SWISS P46934
Peso da proteína 149 kDa
Envio Bolsa de gelo

Contexto biológico: função e localização da NEDD4

  • A NEDD4 (proteína 4 expressa em células precursoras neurais e regulada negativamente durante o desenvolvimento) é uma ligase E3 de ubiquitina-proteína do tipo HECT que transfere ubiquitina para proteínas-alvo, catalisando principalmente a poliubiquitinação ligada à Lys-63. Referências relacionadas: PMID:19920177 PMID:21399620 PMID:23644597
  • Ela regula as tirosina-quinases receptoras por meio da monoubiquitinação de IGF1R e FGFR1, levando à internalização e à degradação lisossômica dessas proteínas. Referências relacionadas: PMID:21765395
  • A NEDD4 ubiquitina moléculas-chave de sinalização, incluindo VEGFR-2/KDFR, RAPGEF2, o domínio intracelular de ERBB4, TNK2 e POLR2A, afetando processos como o desenvolvimento de dendritos neuronais, a sinalização de EGFR e a regulação transcricional. Referências relacionadas: PMID:11598133 PMID:20086093 PMID:19920177
  • Ela forma um complexo de desubiquitinação com a USP13 para clivar cadeias de ubiquitina ligadas à Lys-48 da VPS34, estabilizando a VPS34 e promovendo a formação de autofagossomos. Referências relacionadas: PMID:32101753
  • Subcelularmente, a NEDD4 localiza-se no citoplasma, no núcleo e na membrana celular, em consonância com suas funções na endocitose, na sinalização nuclear e na renovação de proteínas associadas à membrana.
  • O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e as modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem regular sua atividade e suas interações.
  • Durante a infecção viral, a NEDD4 ubiquitina a proteína VP40 do vírus Ebola, facilitando a brotamento viral.

Orientações experimentais e dicas técnicas

  • O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1200–1300 na região C-terminal da NEDD4 humana. Confirme a reatividade do anticorpo com isoformas específicas caso haja múltiplas variantes na amostra-alvo.
  • Para Western blotting, a NEDD4 apresenta peso molecular previsto de aproximadamente 149 kDa. Use uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, SDS-PAGE a 6–8%) e tempos de transferência prolongados para garantir uma transferência eficiente de proteínas de alto peso molecular.
  • Valide o anticorpo no seu sistema de amostra usando controles positivos (por exemplo, lisados de HEK293 ou HeLa) para garantir especificidade e sensibilidade na aplicação pretendida.
  • Para ELISA, considere otimizar as condições de revestimento e detecção para obter a máxima relação sinal-ruído.

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