Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NEDD8 para WB e ELISA - Q15843

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NEDD8

• NEDD8 é uma proteína ubiquitina-like (também conhecida como neddilina) que compartilha similaridade estrutural com a ubiquitina e é um componente-chave da via de neddilação. É codificada pelo gene NEDD8 em humanos (GeneID: 4738).
• O NEDD8 desempenha um papel crítico no controlo do ciclo celular e na embriogénese. A conjugação do NEDD8 às culinas (neddilação) é necessária para o recrutamento da enzima E2 para o complexo E3 ubiquitina ligase culin-RING, facilitando a poliubiquitinação e subsequente degradação proteossomal das ciclinas e outras proteínas reguladoras.
  Referências relacionadas:
  PMID:10318914, PMID:10597293, PMID:11953428
• A neddilação do supressor tumoral p53/TP53 inibe a sua atividade transcricional, ligando o NEDD8 à regulação do p53.
  Referências relacionadas:
  PMID:15242646
• O NEDD8 também neddila o recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), resultando na estabilização da proteína e translocação para a membrana celular.
  Referências relacionadas:
  PMID:28891468
• A ligação covalente do NEDD8 aos seus substratos requer ativação prévia pelo complexo E1 UBE1C-APPBP1 e ligação à enzima E2 UBE2M.
  Referências relacionadas:
  PMID:14690597
• O NEDD8 está principalmente localizado no núcleo, consistente com o seu papel na regulação do ciclo celular e transcricional.
• É altamente expresso no coração, músculo esquelético, baço, timo, próstata, testículo, ovário, cólon e leucócitos do sangue periférico.
• As modificações pós-traducionais do NEDD8 incluem acetilação e a formação de ligações isopeptídicas durante a neddilação. A proteína madura tem um peso molecular de ~9 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange a proteína NEDD8 de comprimento total (aa 1-81), portanto, o anticorpo provavelmente deteta a forma madura de 9 kDa. Considere usar géis de alta percentagem (por exemplo, SDS-PAGE a 15%) e marcadores de baixo peso molecular apropriados para Western blot.
• O anticorpo é relatado para aplicações de WB e ELISA; a adequação para outras técnicas como IHC ou IF pode requerer validação experimental.
• A reatividade cruzada com o NEDD8 de rato e rato é indicada, mas recomenda-se verificar a reatividade no seu sistema experimental específico.
• Para ELISA, considere usar o anticorpo tanto como captura quanto como deteção num formato sanduíche, mas é aconselhada a otimização das condições de revestimento e deteção.
• Armazene o anticorpo conforme recomendado (enviado em sacos de gelo) e evite ciclos repetidos de congelação-descongelação para manter a estabilidade.

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