Anticorpo Monoclonal Anti-Nesprin 1 para WB, IF/ICC e ELISA - Q8NF91

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Nesprin 1

• Nesprin-1 (também conhecida como SYNE1, Enaptina, MYNE1, KASH1) é uma proteína modular multi-isomérica que forma uma rede de ligação entre organelas e o citoesqueleto de actina para manter a organização espacial subcelular.
• Como componente principal do complexo LINC (Ligador do Nucleosqueleto e Citoesqueleto), ele conecta a lâmina nuclear ao citoesqueleto, mediando a transmissão de força mecânica através do envelope nuclear e regulando o movimento e posicionamento do núcleo.
• Junto com os complexos motores citoplasmáticos dineína-dinactina e SUN1/2, a Nesprin-1 pode participar da ligação núcleo-centrossomo e migração nuclear em progenitores neurais, com SYNE1 e SYNE2 agindo de forma redundante.
• É necessária para a migração do centrossomo para a superfície apical da célula durante a ciliogênese inicial e pode contribuir para a remodelação nuclear durante a formação da cabeça do espermatozoide por meio de um provável complexo LINC SUN3:SYNE1/KASH1.
• A localização subcelular inclui a membrana externa nuclear, envelope nuclear, citoplasma, citoesqueleto, sarcômero das miofibrilas e aparelho de Golgi.
• É amplamente expressa com altos níveis nos músculos esquelético e liso, coração, baço, leucócitos do sangue periférico, pâncreas, cerebelo, estômago, rim e placenta; a isoforma GSRP-56 é expressa predominantemente no coração e no músculo esquelético.
• As principais modificações pós-traduccionais e características estruturais incluem splicing alternativo, fosforilação, formação de pontes dissulfeto e a presença de repetições de espectrina e uma hélice transmembrana, conforme indicado pelas palavras-chave do UniProt.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para western blotting, a Nesprin-1 existe em múltiplas isoformas; a isoforma principal migra aproximadamente a 1011 kDa, enquanto uma isoforma menor pode aparecer em torno de 112 kDa. Use uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, 4-6% de SDS-PAGE) e tempos de transferência estendidos para garantir que proteínas de alto peso molecular sejam transferidas eficientemente.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica, espere marcação no envelope nuclear, citoplasma e possivelmente estruturas do citoesqueleto. Valide com marcadores de localização subcelular conhecidos.
• Para ELISA, certifique-se de que a cobertura de antígeno e a diluição do anticorpo estão otimizadas usando o imunógeno recombinante como padrão de referência.

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