Anticorpo policlonal anti-Nesprin 1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8NF91

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Nesprin 1

• A Nesprin-1 (proteína 1 com repetições de espectrina do envelope nuclear), codificada pelo gene SYNE1, é uma proteína modular multi-isomérica com massa molecular de aproximadamente 1011 kDa em seu comprimento total. Múltiplas variantes de splicing dão origem a isoformas específicas de determinados tecidos, incluindo uma forma menor de aproximadamente 112 kDa.
• Como componente central do complexo LINC (Linker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton), a Nesprin-1 conecta a lâmina nuclear ao citoesqueleto de actina, facilitando a transmissão de forças mecânicas através do envelope nuclear e regulando o posicionamento e o movimento do núcleo.
• A SYNE1 atua de forma redundante com seu parálogO SYNE2 em processos como a ligação núcleo-centrossomo e a migração nuclear em progenitores neurais, frequentemente em associação com proteínas do domínio SUN e complexos motores citoplasmáticos de dineína-dinactina.
• Subcelularmente, a Nesprin-1 está localizada predominantemente na membrana nuclear externa, mas também é encontrada no envelope nuclear, no citoesqueleto, nos sarcômeros e no aparelho de Golgi, refletindo seus diversos papéis na arquitetura intracelular.
• A proteína contém repetições de espectrina e um domínio KASH C-terminal, que a ancora ao envelope nuclear. Ela está sujeita à fosforilação e potencialmente a outras modificações pós-traducionais, conforme indicado por dados de proteômica.
• A Nesprin-1 é amplamente expressa, com níveis mais elevados nos músculos esquelético e liso, coração, baço e vários outros tecidos. Uma isoforma curta (GSRP-56) é predominantemente expressa no coração e no músculo esquelético.
• Mutações no SYNE1 estão associadas à distrofia muscular de Emery-Dreifuss e a outras doenças, ressaltando o papel fundamental da proteína na função muscular e na mecânica nuclear.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 8220–8410 localizados na região de repetição de espectrina da isoforma 2 da Nesprin-1 humana. Essa sequência é conservada nos ortólogos de camundongo e rato, favorecendo a reatividade cruzada.
• Para a detecção por Western blot, observe que a Nesprin-1 de comprimento total (~1011 kDa) requer protocolos especializados de transferência de proteínas de alto peso molecular. Uma banda mais facilmente detectável próxima de 112 kDa pode representar isoformas menores ou produtos de clivagem.
• Em aplicações de imunofluorescência, a Nesprin-1 normalmente apresenta um padrão de marcação na borda nuclear e filamentoso citoplasmático; recomenda-se uma fixação adequada (por exemplo, PFA a 4%) e permeabilização.
• Quando utilizada em imuno-histoquímica em cortes de parafina, pode ser necessária a recuperação antigênica; valide a especificidade da marcação utilizando controles positivos e negativos apropriados.

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